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聚乙二醇（PEG）是一種合成親水性生物相容聚合物，化學(xué)結(jié)構(gòu)為H?(O?CH2?CH2)n?OH，PEG在醫(yī)療、化學(xué)和工業(yè)領(lǐng)域均有著極為廣泛的應(yīng)用。PEG具有無毒、無免疫原性、水溶性和生物兼容性好等特點(diǎn)，可以用于修飾藥物蛋白，保護(hù)藥物分子，延長其作用半衰期。
聚乙二醇修飾即PEG化，是將活化的PEG通過化學(xué)方法以共價(jià)鍵偶聯(lián)到蛋白質(zhì)或多肽分子上。PEG修飾會(huì)改變藥物的物理化學(xué)性質(zhì)，增加藥物在體內(nèi)停留時(shí)間，還能影響藥物和細(xì)胞受體結(jié)合的親和力。PEG已獲FDA認(rèn)可，對蛋白質(zhì)的改造具有無可取代的優(yōu)勢。聚乙二醇化修飾技術(shù)通過共價(jià)鍵，將聚乙二醇與被修飾藥物偶聯(lián)，改善藥物的理化性質(zhì)和生物學(xué)活性，這種技術(shù)現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)(肽類)、酶、抗體及小分子藥物。
美國Life Diagnostics公司專注于研發(fā)和生產(chǎn)臨床前研究以及動(dòng)物醫(yī)學(xué)診斷相關(guān)的ELISA試劑盒、純化的生物標(biāo)志物和抗體等產(chǎn)品。產(chǎn)品覆蓋心血管疾病、急性期反應(yīng)、免疫毒性和免疫學(xué)標(biāo)志物等研究領(lǐng)域，主要應(yīng)用于小鼠、大鼠、兔、貓、狗、豬、猴和雞等物種。此外，鑒于越來越多的研究圍繞聚乙二醇化（PEGylated）生物制劑，Life Diagnostics也開發(fā)了PEG相關(guān)試劑，包括抗體、ELISA試劑盒和聚乙二醇化蛋白。此外，Life Diagnostics還提供封閉緩沖液，專門設(shè)計(jì)用于免疫檢測PEG或PEG化抗體。
PEG抗體
Life Diagnostics自主研發(fā)生產(chǎn)5種小鼠單克隆抗PEG抗體，可識(shí)別具有不同親和力的PEG聚合物主鏈，還有可識(shí)別mPEG末端甲氧基的2種抗體。
| 產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 描述 |
5D6-3 | Anti-methoxy-PEG Monoclonal, Clone 5D6-3 | 100 ug/1 mg | ● 識(shí)別mPEG鏈的末端甲氧基 ● Kd < 10-10 M ● 可與9B5-6-25-7配對 ● 小鼠單克隆抗體(IgG1k) |
5H4-2 | Anti-methoxy-PEG Monoclonal, Clone 5H4-2 | 100 ug/1 mg | ● 識(shí)別mPEG鏈的末端甲氧基 ● Kd < 10-10 M ● 可與9B5-6-25-7配對 ● 小鼠單克隆抗體(IgG1k) |
1D9-6 | Anti-PEG Monoclonal, Clone 1D9-6 | 100 ug/1 mg | ● 骨架特異性，可用于ELISA ● 在間接ELISA中識(shí)別分子量為550 Da或更大的PEG ● Kd = 2.88 x 10-9 M ● Life Diagnostics的試劑盒中使用了該抗體 |
9B5-6-25-7 | Anti-PEG Monoclonal, Clone 9B5-6-25-7 | 100 ug/1 mg | ● 骨架特異性，可用于ELISA和免疫親和純化（見9B5-AG） ● 在間接ELISA中識(shí)別分子量為550 Da或更大的PEG ● Kd = 1.8 x 10-9 M ● 這是Life Diagnostics親和力最高的PEG-骨架抗體 注意：避免和吐溫-20、Triton-X-10等去垢劑同時(shí)使用， 去垢劑會(huì)干擾抗體與PEG和PEG化蛋白的結(jié)合 |
3F12-1 | Anti-PEG Monoclonal, Clone 3F12-1 | 100 ug/1 mg | ● 骨架特異性 ● 在間接ELISA中識(shí)別分子量為550 Da或更大的PEG ● Kd = 1.84 x 10-8 M |
10E3-1-4 | Anti-PEG Monoclonal, Clone 10E3-1-4 | 100 ug/1 mg | ● 骨架特異性 ● 在間接ELISA中識(shí)別分子量為550 Da或更大的PEG ● Kd = 3.7 x 10-8 M |
PEGPAB-01 | Anti-PEG Rabbit Polyclonal IgG Antibody | 100 ug/1 mg | ● 骨架特異性-在非甲氧基PEG瓊脂糖上進(jìn)行親和純化 ● 識(shí)別分子量為550 Da或更大的PEG |
PEG ELISA試劑盒
Life Diagnostics可提供用于檢測甲氧基PEG和非甲氧基PEG（游離和偶聯(lián)）的ELISA試劑盒，以及用于檢測小鼠、大鼠、猴子和人血清或血漿中的抗PEG-IgM和IgG的ELISA試劑盒。
● 競爭法ELISA試劑盒用于檢測PEG化蛋白(含甲氧基，或不含甲氧基)；
● 夾心法ELISA試劑盒用于快速檢測甲氧基PEG(mPEG)和mPEG化蛋白；
● 抗PEG IgG和IgM ELISA試劑盒用于檢測小鼠、大鼠和猴血清或血漿中PEG抗體的水平
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
PEG | PEG ELISA kit | 96 well |
MPEG | mPEG ELISA kit | 96 well |
PEGG-1 | Mouse Anti-PEG IgG ELISA kit | 96 well |
PEGM-1 | Mouse Anti-PEG IgM ELISA kit | 96 well |
PEGG-2 | Rat Anti-PEG IgG ELISA kit | 96 well |
PEGM-2 | Rat Anti-PEG IgM ELISA kit | 96 well |
PEGG-3 | Monkey Anti-PEG IgG ELISA kit | 96 well |
PEGM-3 | Monkey Anti-PEG IgM ELISA kit | 96 well |
PEGG-10 | Rabbit Anti-PEG IgG ELISA kit | 96 well |
PEGM-10 | Rabbit Anti-PEG IgM ELISA kit | 96 well |
PEGG-20 | Human Anti-PEG IgG ELISA kit | 96 well |
PEGM-20 | Human Anti-PEG IgM ELISA kit | 96 well |
圖1.使用甲氧基聚乙二醇-血藍(lán)蛋白（mPEG-KLH）對小鼠進(jìn)行免疫（n=5 for each study）。收集第7天和第25天的血清樣品，分別用于Anti-PEG IgM和Anti-PEG IgG的檢測。用mPEG-BSA (PBSA-01) 包被的微孔板（i）和非甲氧基聚乙二醇-BSA（PBSA-01p）包被的微孔板（ii）檢測，非甲氧基聚乙二醇-BSA上的甲氧基被戊酸基團(tuán)取代。比較兩塊板上的反應(yīng)活性，可評估出針對甲氧基和聚乙二醇主鏈的抗體水平。從上圖中可以看出，在IgM研究中，來自所有5只小鼠的血清對甲氧基和非甲氧基PEG-BSA的反應(yīng)活性完-全一致，表明所有小鼠都產(chǎn)生了針對PEG主鏈的IgM抗體。在IgG的研究中， 5只小鼠中有4只的血清樣品針對兩種PEG抗原具有相同反應(yīng)活性，表明這些小鼠都產(chǎn)生了針對PEG主鏈的抗體。然而，編號(hào)M888小鼠對甲氧基PEG-BSA的反應(yīng)活性高出3倍，表明主要的抗體反應(yīng)是針對甲氧基。
Life Diagnostics anti-PEG ELISA試劑盒中提供的是甲氧基PEG包被板。非甲氧基PEG包被板可根據(jù)要求提供。
PEG包被板和封閉緩沖液適用于有興趣自己開發(fā)PEG試劑盒的客戶。許多市售的ELISA緩沖液含有吐溫-20或其他聚氧乙烯去垢劑，這些去垢劑會(huì)嚴(yán)重干擾PEG檢測。Life Diagnostics的封閉緩沖液不含聚氧乙烯去垢劑，可用于封閉和穩(wěn)定包被有PEG化蛋白或PEG抗體的板。
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 描述 |
PEGB125-1 | PEG Blocker, 125 ml | 125 ml | |
PEGD50-1 | PEG Diluent, 50 ml | 50 ml | 不能用于mPEG kit |
PEGW50-20 | PEG Wash, 50 ml (20x) | 50 ml | 不能用于mPEG kit |
PEG SPARCL™試劑盒
Life Diagnostics開發(fā)了SPARCL™ 試劑盒用于檢測甲氧基-PEG（mPEG）和非甲氧基PEG?？蓹z測游離的PEG和PEG化的蛋白質(zhì)。靈敏度隨PEG鏈長度和PEG化程度的不同而變化。
SPARCL™檢測具有以下特點(diǎn)：
● 發(fā)光免疫測定法
● 只需一次30分鐘的孵育
● 無需洗滌步驟
● 高靈敏度
● 高通量
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
PEG-SP | PEG SPARCL™ Assay kit | 96 well |
MPEG-SP | mPEG SPARCL™ Assay kit | 96 well |
圖2.對于分子量5kDa或更大的線性PEG鏈，觀察到良好的反應(yīng)性。
PEG化蛋白
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 描述 |
PKLH-01 | Multi PEGylated KLH | 1 mg | ●適合用作免疫原或參考標(biāo)準(zhǔn)品 ●使用Life Diagnostics PEG ELISA檢測，EC50為0.3 ng/ml |
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