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細(xì)胞免疫熒光的詳細(xì)操作步驟

來源:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司   2023年08月28日 11:42  

細(xì)胞免疫熒光的詳細(xì)操作步驟

1,取出細(xì)胞爬片放到35mm或60mm用過的細(xì)胞培養(yǎng)皿里,PBS洗三遍。注意有的時(shí)候作的細(xì)胞爬片可能比較小,因此夾取的時(shí)候要小心。

2,4%多聚甲醛固定20分鐘,PBS洗三遍。

3,0.2%Triton X 100通透10分鐘,PBS洗三遍。

4, 與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘,PBS洗三遍。

5.,一抗4度濕盒內(nèi)過夜,也可37度2小時(shí),感覺前者效果好,PBS洗三遍。

6,二抗室溫2小時(shí),或者37度1半小時(shí),PBS洗三遍。

7,最好用DAPI染核,然后直接照熒光片。

8,蒸餾水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周。





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