PCR是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術(shù),PCR技術(shù)有很多,那么我們應(yīng)該如何區(qū)分各種PCR技術(shù)呢?讓我們一起來看看吧!
一、普通PCR
PCR是普通PCR,以雙鏈DNA為模板,以dNTP為底物,特異性地擴增雙鏈DNA。然后采用瓊脂糖凝膠電泳對產(chǎn)物進行檢測,只能做定性分析。
二、實時熒光定量PCR
qPCR和Real-time PCR是實時熒光定量PCR,以cDNA為模板,以dNTP為底物,對擴增出的DNA進行定量分析。實時熒光定量PCR常用的方法:水解探針法和熒光染料法。
三、逆轉(zhuǎn)錄PCR
RT-PCR 是逆轉(zhuǎn)錄PCR,采用 Oligo(dT) 或隨機引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成 cDNA,再以 cDNA 為模板進行 PCR 擴增,結(jié)果只能定性,不能定量。
四、實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR
RT-qPCR是實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR,是qPCR+RT-PCR的組合,將總RNA或mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA后再作為模板,以dNTP為底物,進行qPCR的定量分析。
五、數(shù)字PCR
dPCR是數(shù)字PCR即三代PCR,是一種能夠?qū)崿F(xiàn)核酸絕對定量的精準檢測技術(shù),基于泊松分布原理將核酸樣品分配到大量獨立、平行的微反應(yīng)單元(納升級)中,使每個反應(yīng)室中平均只有一個拷貝或者沒有目標DNA分子,然后加入熒光信號進行擴增,從而實現(xiàn)靶標核酸分子的絕對計數(shù),提高檢測靈敏度和準確度。
更多有關(guān)如何區(qū)分各種PCR技術(shù)的問題,請聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司:
相關(guān)產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。