鏈親和素磁珠,也稱為SA磁珠,是2.8µm的超順磁性顆粒,與高純形式的鏈親和素共價偶聯(lián)。該珠可用于捕獲生物素標(biāo)記的底物,包括抗原、抗體和核酸。鏈霉親和素磁珠可用于捕獲生物素標(biāo)記的底物,包括抗原、抗體和核酸。
艾美捷鏈霉親和素磁珠:
目錄:C-BETA2002
名稱:鏈霉親和素磁珠-2.8μm
平均直徑:2.8μm
濃度:10 mg/ml
共軛:鏈親和素
無菌/內(nèi)毒素:無菌,無內(nèi)毒素
蛋白質(zhì)濃度:0.6 mg/10 mg珠子
尺寸:2mL/10mL/100mL
特異性:生物素化配體
緩沖液:1xPBS,pH 7.4,0.1%BSA,2mM EDTA
儲存溫度:2℃至8℃
保質(zhì)期:2年
鏈霉親和素磁珠協(xié)議:
1.捕獲生物素化核酸
1.1為了確保均勻性,在使用前,用20秒的輕柔渦流將珠子充分混合。將100μL鏈霉親和素磁珠加入1.5 mL微量離心管中。將試管放入磁性支架中,收集珠子。取出并丟棄上清液。
注:建議生物素化分子和磁珠之間使用1:1或2:1的比例,以實現(xiàn)磁珠結(jié)合的飽和。生物礦化分子的量需要根據(jù)實驗條件進(jìn)行優(yōu)化。
1.2向試管中加入1mL洗滌緩沖液A。將管子倒置幾次或輕輕地渦旋混合。用磁性支架收集珠子,然后取出并丟棄上清液,重復(fù)洗滌兩次。
注:當(dāng)使用體積大于1 mL的磁珠時,建議向磁珠中添加等量的洗滌緩沖液a。
1.3加入用洗滌緩沖液A稀釋的500μL生物素化核酸(以達(dá)到2mg/mL的珠濃度),通過振蕩充分混合,并在室溫下在搖床上孵育30分鐘或在4℃下孵育2小時。
1.4用磁性支架收集珠子,并將上清液移到新的試管中。
1.5重復(fù)“步驟1.2”兩次,清洗磁珠。
1.6根據(jù)后續(xù)實驗的要求,加入合適的低鹽緩沖液,使磁珠重新懸浮。生物素化核酸的捕獲步驟現(xiàn)已完成。磁珠可以用于后續(xù)的實驗操作。
2.捕獲生物素化抗體/蛋白質(zhì)
2.1為了確保均勻性,在使用前,用20秒的輕柔渦流將珠子充分混合。將100μL鏈霉親和素磁珠加入1.5 mL微量離心管中。將試管放入磁性支架中,收集珠子。取出并丟棄上清液。
注:建議生物素化分子和磁珠之間使用1:1或2:1的比例,以實現(xiàn)磁珠結(jié)合的飽和。生物礦化分子的量需要根據(jù)實驗條件進(jìn)行優(yōu)化。
2.2向試管中加入1mL洗滌緩沖液B。將管子倒置幾次或輕輕地渦旋混合。用磁性支架收集珠子,然后取出并丟棄上清液,重復(fù)第三次洗滌。
注:當(dāng)使用體積大于1毫升的磁珠時,建議在磁珠中加入等量的洗滌緩沖液B。
2.3加入用洗滌緩沖液B稀釋的500μL生物素化抗體/蛋白質(zhì)(以達(dá)到1mg/mL的珠濃度),通過搖動充分混合,并在室溫下在搖動器上孵育1小時。
2.4用磁性支架收集珠子,并將上清液移到新的試管中。
2.5第五次重復(fù)“步驟2.2”,清洗磁珠。
2.6根據(jù)后續(xù)實驗的要求,加入合適的低鹽緩沖液,使磁珠重新懸浮。生物素化抗體/蛋白質(zhì)的捕獲現(xiàn)已完成。磁珠可以用于后續(xù)的實驗操作。
洗滌緩沖液:
注:
●將珠粒的pH值保持在6-8之間,避免冷凍和離心。
●避免將磁珠長時間暴露在磁場中,以防止磁珠聚集,從而降低結(jié)合活性。
●為了最大限度地減少磁珠的損失,磁分離時間應(yīng)不少于1分鐘。
●在制備生物素化樣品的過程中,使用脫鹽柱去除游離生物素。
●轉(zhuǎn)移磁珠時,應(yīng)通過搖動確保徹-底再懸浮,并避免操作過程中出現(xiàn)氣泡
本品僅供研究使用。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。