手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
聚合酶鏈式反應(PCR)是基因工程中常用的一種分子生物學技術(shù)，PCR管通過模擬體內(nèi)DNA復制過程快速合成特定DNA片段。其原理基于DNA的復制過程，包括三個步驟：變性、退火和延伸。
變性(Denaturation)階段，反應體系中的DNA雙鏈結(jié)構(gòu)在高溫(通常為94°C-98°C)下被分離成兩條單鏈DNA。這一步是通過加熱使兩條DNA鏈斷裂，目的是將DNA的雙鏈結(jié)構(gòu)變?yōu)閱捂溄Y(jié)構(gòu)以提供模板。
退火(Annealing)階段，溫度被降低至50°C-65°C，此時引物(Primers)能夠與目標DNA序列的互補區(qū)域結(jié)合，因為引物與目標DNA序列的堿基配對具有特異性。引物的選擇是PCR反應設計中重要的一環(huán)，其長度一般為18-30個堿基，并且具有雙鏈DNA穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。引物的位置決定了擴增片段的大小。
延伸(Extension)階段，延伸溫度一般設定在72°C，本階段需要一種特殊的酶——DNA聚合酶(DNApolymerase)。在該酶的催化下，引物結(jié)合至目標DNA上時，DNA聚合酶會從引物的3’端開始合成新的DNA鏈，直到達到目標DNA的3’端為止。該酶使用反應體系中的四種核苷酸(dNTPs)作為合成材料，并且能夠識別引物與DNA模板的堿基配對，使目標DNA的兩條鏈都得到復制。
PCR管的維護保養(yǎng)方法：
1.使用前檢查完整性，確保沒有破損或污染。
2.避免將暴露在強光下，以免對PCR反應產(chǎn)生干擾。
3.存放時，應避免存放在高溫或陽光直射的地方。
4.使用塑料架或托盤來保護，避免直接接觸硬表面，防止破損。
5.在退出蓋前，確保已經(jīng)降溫，以避免熱氣壓的影響導致樣品飛濺。
6.定期檢查標記是否清晰可讀，如有磨損或模糊應及時更換。
7.避免使用廢舊，以免可能存在的殘留對實驗結(jié)果產(chǎn)生干擾。
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關權(quán)利。
采購中心