藍(lán)色熒光蛋白Azurite簡(jiǎn)介
GFP由238個(gè)氨基酸殘基組成。GFP序列中的65-67位殘基(Ser65-Tyr66-Gly67)可自發(fā)形成熒光發(fā)色基團(tuán)——對(duì)羥基苯咪唑啉酮GFP的激發(fā)光譜在400nm附近有一個(gè)主激發(fā)峰,在470nm附近有一個(gè)次激發(fā)峰。發(fā)射光譜在505nm附近有一尖銳的主發(fā)射峰,在540nm附近有一肩峰GFP的化學(xué)性質(zhì)相當(dāng)穩(wěn)定,無光漂白現(xiàn)象(Photobleaching),用甲醛固定和石蠟包埋亦不影響其熒光性質(zhì)。在細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)領(lǐng)域中,綠色熒光蛋白基因常被用作報(bào)告基因。
綠色熒光蛋白的亮度均較高,與此相反,在微觀應(yīng)用領(lǐng)域中,藍(lán)色熒光蛋白的發(fā)射光強(qiáng)通常會(huì)降低。EBFP(增強(qiáng)型藍(lán)色熒光蛋白)是經(jīng)過幾輪 wtGFP 突變而形成的。突變體(Y66H)發(fā)射峰跳過綠色直接到藍(lán)色光譜,而隨后的突變體則產(chǎn)生激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為 380 nm 和 448 nm 。這些光譜屬性令其成為EGFP 在 FRET 顯微鏡中的“搭檔”。新發(fā)現(xiàn)的藍(lán)色熒光蛋白包括Azurite、SBFP2 以及 EBFP2,這些熒光蛋白具有較高和較好的量子產(chǎn)率和光穩(wěn)定性。Sirius 是一款接替 EBFP 的熒光蛋白,這種蛋白因其對(duì) pH 的高耐受力(pH 3 -9 范圍內(nèi)均能保持穩(wěn)定)而被應(yīng)用,是發(fā)射波長(zhǎng)短的熒光蛋白。
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Superfolder GFP
以上資料來自小編MSQ,2023.09.25
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