綠色熒光蛋白UKG\Emerald\Superfolder介紹
EBFP是Aequorea GFP來(lái)源的光譜變體之一,但其亮度低、光穩(wěn)定性差,改進(jìn)的藍(lán)色Aequorea熒光蛋白變體與EBFP相比,亮度和光敏感性有明顯增強(qiáng)。這些新的變體被命名為Azurite(石青或藍(lán)銅礦)、強(qiáng)力增強(qiáng)型藍(lán)色熒光蛋白2(strongly enhanced blue fluorescent protein 2, SBFP2)及EBFP2,使得活細(xì)胞在藍(lán)色光譜區(qū)域成功地長(zhǎng)時(shí)間成像成為可能。即使這三種熒光蛋白在高濃度的微環(huán)境中表現(xiàn)出很弱的二聚體特性,但是它們能夠在與亞細(xì)胞定位的靶蛋白融合中有效地發(fā)揮作用,并且它們能夠很容易地通過(guò)濾光片設(shè)備與標(biāo)準(zhǔn)的BFP及4', 6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole, DAPI)一起成像。這些BFP變體都可以通過(guò)A206K突變改造成真正的單體,而且這種突變不會(huì)影響它們的特性。重要的是,亮度強(qiáng)、光穩(wěn)定性強(qiáng)的藍(lán)色熒光蛋白EBFP2,是EGFP在活細(xì)胞中FRET的很好的供體。
Emerald包含F(xiàn)64L和S65T突變,另外還有四個(gè)點(diǎn)突變從而改進(jìn)了折疊、37℃時(shí)的突變率以及亮度。雖然Emerald比EGFP更有效,但含有快速光漂白成分,可能在某些環(huán)境下其定量成像會(huì)受到影響。
Emerald 是一種 GFP 修飾,其光穩(wěn)定性和亮度都經(jīng)過(guò)了改善,且它在哺乳類細(xì)胞中可以更高效地進(jìn)行蛋白折疊。
Superfolder GFP整合了9個(gè)點(diǎn)突變:S30R、Y39N、F99S、N105T、Y145F、M153T、V163A、I171V以及A260V。相比于野生型的GFP,Superfolder GFP具有好的穩(wěn)定性及高效的折疊動(dòng)力學(xué)(能在37 ℃條件下高效折疊),亮度也比EGFP要高,同時(shí)表現(xiàn)出相比與GFP家族其他成員強(qiáng)的抗酸堿性。
【相關(guān)產(chǎn)品】
綠色熒光蛋白UKG
Emerald綠色熒光蛋白
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增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP)
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以上資料來(lái)自小編MSQ,2023.09.27
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