使用前處理:大部分血清在使用前必須滅活處理,即56℃30分鐘。滅活的目的是去除血清中的補體成分,避免補體對細胞產(chǎn)生毒性作用。血清經(jīng)過滅活也會損失一些對細胞有利的成分,如生長因子,因此也有人提出血清不經(jīng)滅活直接用于培養(yǎng),這樣做的前提是確認血清中不含補體成分。對于一些品質(zhì)高的胎牛血清和新牛血清可以考慮不經(jīng)滅活直接用于細胞培養(yǎng)。
儲存條件:血清一般儲存于-20℃,同時應(yīng)避免反復(fù)凍融。購買大包裝的血清后,首先要滅活處理,然后分裝成小包裝,儲存于-20℃,使用前融化。融化時現(xiàn)置于4℃。融化后的血清在4℃不宜長時間存放,應(yīng)盡快使用。
注意事項:
1、血清解凍:將血清從冰凍區(qū)中取出后(切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀),先置于2~8℃區(qū)域中使之融化,然后在室溫下使之全融。使用前再預(yù)溫到將使用的溫度(如37℃),但必須注意的是,解凍過程中應(yīng)輕輕地搖晃均勻。
血清在解凍過程中可能會出現(xiàn)少量絮狀或片狀析出物,主要是血清中脂蛋白的變性或是纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但這些析出物,并不影響血清本身的質(zhì)量。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
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