Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):16005
產(chǎn)品規(guī)格:500次/1000次
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)是根據(jù)的兩種蛋白濃度檢測(cè)方法之一Bradford法研制而成,實(shí)現(xiàn)了蛋白濃度測(cè)定的快速,穩(wěn)定和高靈敏度。檢測(cè)速度極快,10-20個(gè)樣品只需不足10分鐘即可完成。靈敏度高,檢測(cè)濃度下限達(dá)到25μg/ml,最小檢測(cè)蛋白量達(dá)到0.5μg,待測(cè)樣品體積為1-20μl。在50-1000μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。
Bradford法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。樣品中β-巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá)5mM。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20,60,80低于0.015%。含去垢劑的樣品推薦使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒。
包裝清單:
產(chǎn)品名稱 | 500次包裝 | 1000次包裝 | 儲(chǔ)存條件 |
Bradford溶液 | 100ml | 200ml | 2-8℃ |
蛋白標(biāo)準(zhǔn)BSA (5mg/ml) | 1ml | 2ml | -20℃ |
操作步驟:
1. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備
融化蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,取10μl稀釋至100μl,使終濃度為0.5mg/ml。蛋白樣品在什么溶液中,標(biāo)準(zhǔn)品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡(jiǎn)便起見(jiàn),也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 蛋白濃度測(cè)定
a. 將標(biāo)準(zhǔn)品按0、1、2、4、8、12、16、20μl加到96孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔中,加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)足到20μl, 相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。
b. 加適當(dāng)體積樣品到96孔板的樣品孔中。如果樣品不足20μl,需加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)足到20μl。請(qǐng)注意記錄樣品體積。
c. 各孔加入200μl Bradford溶液,室溫放置3-5分鐘。
d. 用酶標(biāo)儀測(cè)定A595,或560-610nm之間的其它波長(zhǎng)的吸光度。
e. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和使用的樣品體積計(jì)算出樣品中的蛋白濃度。
注意事項(xiàng):
1. Bradford溶液使用前請(qǐng)顛倒3-5次,混勻。
2. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)請(qǐng)?jiān)谌咳芙夂笙然靹?,再稀釋成一系列不同濃度的蛋白?biāo)準(zhǔn)。
3. 將Bradford溶液恢復(fù)到室溫再使用,有利于提高檢測(cè)的靈敏度。
4. 需可檢測(cè)560-610nm之間波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀一臺(tái),最佳檢測(cè)波長(zhǎng)為595nm。并需96孔板。
5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
保存條件:
Bradford溶液4℃保存,蛋白標(biāo)準(zhǔn)-20℃保存,本試劑盒自訂購(gòu)之日起12個(gè)月內(nèi)有效。
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