Lonza 4d-Nucleofector X小體積轉(zhuǎn)染應(yīng)用分享!

4D-Nucleofector® X Unit 是4D-Nucleofector®系統(tǒng)四個功能模塊之一,用于2 × 104到2 × 107細(xì)胞量的轉(zhuǎn)染,X模塊中不同的電極模式(電極板或電極條)可選用相同的電轉(zhuǎn)程序,系統(tǒng)可自動轉(zhuǎn)化應(yīng)用于不同模塊的參數(shù),客戶無需進(jìn)行額外操作,實現(xiàn)實驗的方便性與靈活性大化。
4D-Nucleofector® X Unit 特點
1.4D Nucleofector 核轉(zhuǎn)系統(tǒng)X模塊可同時轉(zhuǎn)染2個100μL電極杯或1個16孔電極板條(每孔20μL)。
2.電極杯和電極板條可以選用相同的電轉(zhuǎn)程序。
3.每個電轉(zhuǎn)杯、每個孔可獨(dú)立設(shè)置程序。
4.操作簡單靈活。
1)20ul與100ul)使用相同的操作手冊。
2)100ul 轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)量最多可達(dá)2 x 107。
3)20ul 轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)量最少到2 x 104。
5.通量多元化。
1)細(xì)胞通量的1-16個樣。
2)可預(yù)設(shè)50個以上參數(shù),針對100ul 體系。
3)可根據(jù)您的要求選擇20ul體系減少試劑費(fèi)用支出。
6.轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞。
1)5種試劑盒可覆蓋所有原代細(xì)胞類型。
2)轉(zhuǎn)染優(yōu)化實驗更加簡易便宜(如果您的細(xì)胞在數(shù)據(jù)庫中沒有需要自行優(yōu)化)。
應(yīng)用案例分享
一,原代小鼠和人T細(xì)胞的KO



1.小鼠和人類T細(xì)胞中CRISPR/Cas9介導(dǎo)的基因KO效率高達(dá)90%以上
2.各種細(xì)胞表面受體(CTLA4,PD1),TF和細(xì)胞因子的KO
3.可以以類似的效率生成雙基因KO
二,原代人T細(xì)胞的KI

1.激活2d后進(jìn)行電轉(zhuǎn),CD3/28
2.90 g,10 min
3.Solution P3,4D 96 well unit
4.EH 115
5.one million T cells/20 μL
6.2.5 μL RNP(50 pmol)+2μL HDR(4 μg)
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