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高通量蛋白樣品純化利器——PE JANUS G3 BioTx 蛋白純化工作站

來源:上?,|馳儀器有限公司   2023年11月16日 18:58  

從藥物篩選,成藥性分析,結(jié)構(gòu)優(yōu)化,藥理毒理研究直至細(xì)胞株構(gòu)建,上下游工藝開發(fā)等環(huán)節(jié)——海量的蛋白樣品撲面而來,做不完的純化實(shí)驗(yàn),長夜漫漫等待下一個(gè)樣品純化,單個(gè)樣品動(dòng)輒3-4個(gè)小時(shí)的時(shí)間消耗……可謂是苦“蛋白純化實(shí)驗(yàn)”久矣。


高通量蛋白純化工作站為加速生物治療分子的發(fā)展提供了機(jī)會(huì)。純化條件的小型化縮短了時(shí)間,允許樣品批量平行處理,提供了更高的統(tǒng)計(jì)顯著性和更大的變量寬度。


JANUS G3 BioTx 蛋白純化工作站采用模塊化配置,同一平臺達(dá)成四種模式小規(guī)模蛋白純化的自動(dòng)化:

  • PhyNexus PhyTips® 帶填料吸頭

  • GE PreDictor™ / Pall AcroPrep™ 過濾板

  • Atoll RoboColumns® 層析柱

  • 重力流柱,兼容脫鹽、蛋白換液


模塊之間任意搭配或組合,只需一臺儀器即可對各種體積和濃度的樣品的快速處理,為上下游流程中“質(zhì)量源于設(shè)計(jì)”實(shí)驗(yàn)提供高質(zhì)量的蛋白樣品。



JANUS G3 BioTx 蛋白純化工作站




JANUS G3 BioTx Pro Plus蛋白純化工作站兼容層析柱、帶填料吸頭


匠心獨(dú)運(yùn)的設(shè)計(jì)理念,備受歡迎的技術(shù)呈現(xiàn),和JANUS G3始終從客戶應(yīng)用出發(fā)的視角是分不開的。


靈活處理大量蛋白樣品


純化樣品量比較多時(shí):

Varispan 8通道移液臂以及配套多功能移液針單次可平行獨(dú)立處理8個(gè)樣品,可根據(jù)程序設(shè)計(jì)依次處理不同column組別;移動(dòng)間距范圍寬廣兼容不同柱型、收集板以及試劑槽類型;試劑槽可根據(jù)要求選擇或定制,如消耗量比較多的柱平衡,洗滌和CIP溶液,提供的試劑槽能滿足數(shù)升的試劑容量。



Varispan 8 通道移液臂以及配套多功能移液針



用于樹脂篩選和方法開發(fā)的預(yù)包裝色譜柱


MDT模塊化分液技術(shù),可實(shí)時(shí)自動(dòng)化切換不同規(guī)格的96和384通道移液頭,一次實(shí)現(xiàn)96/384通道的樣品抽濾或者PhyTips帶填料吸頭純化,大大提高純化效率。配合抓扳手的使用,可實(shí)現(xiàn)整個(gè)抽濾環(huán)節(jié)的全自動(dòng)處理,無需人工干預(yù)。



MDT分液技術(shù)實(shí)現(xiàn)96/384通道樣品抽濾 AcroPrep 96孔過濾板





AcroPrep 96孔過濾板


樣品體積比較大時(shí)

四通閥液體置換注射計(jì)量泵賦予移液吸頭單次可大體積5mL吸液的能力,減少多次重復(fù)吸液的次數(shù),縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間;同時(shí)為了得到更大回收率的蛋白樣品,可最大限度降低液體流加速度,提高保留時(shí)間。


除此之外,當(dāng)進(jìn)行完大體積移液需要更換樣品時(shí),鋼針連同注射泵內(nèi)外可自動(dòng)完成內(nèi)外清洗,避免交叉污染的產(chǎn)生。






四通閥注射計(jì)量泵原理示意圖



液相驅(qū)動(dòng),高精度移液


蛋白樣品純化時(shí)

需要使用到數(shù)種不同組分的液體,如柱平衡液、不同鹽濃度不同pH的雜蛋白洗脫液,最適的洗脫液以及柱再生液體。3板位滑動(dòng)式傳送帶,可快速帶走廢液,還可定制廢液收集板,廢液體積比較大時(shí),瞬時(shí)快速帶走。



滑動(dòng)式傳送帶plate shuttle


純化過程的精準(zhǔn)控制

1、AccuSense液面感應(yīng)技術(shù),自動(dòng)液面探測和追蹤:層析柱重力柱內(nèi)液面,試劑槽液體位置,確保清洗液充分清洗鋼針。







固定鋼針或者吸頭可探測或追蹤液面位置


2、當(dāng)需要對蛋白樣品進(jìn)行含量,純度,分子量檢測以及表征分析時(shí),需要進(jìn)行比較精準(zhǔn)的歸一化處理,JANUS支持諸多分析檢測設(shè)備如nanodrop數(shù)據(jù)的直接導(dǎo)入,自動(dòng)計(jì)算稀釋體積。同時(shí)在位選擇吸頭,以1uL的移液精度,<3.4%穩(wěn)定性滿足小體積移液的高精度要求。


鋼針吸頭同時(shí)選擇,沒有任何需要人工介入的更換操作步驟;小體積移液精準(zhǔn),大體積移液快速,JANUS G3 高通量小規(guī)模蛋白純化工作站與眾不同。



微量體積移液時(shí),在不同移液體積下,CV值波動(dòng)極小,重復(fù)性



大體積移液時(shí),準(zhǔn)確性均大于99%,CV波動(dòng)性更小


3、移動(dòng)的液體收集板位,除了XY走向的移動(dòng),Z軸同樣可精細(xì)化調(diào)節(jié)。PerkinElmerAssay Plate設(shè)計(jì),使得收集板和柱子底端的間距可縮短至0.5mm,以便每個(gè)樣品單獨(dú)進(jìn)入各自收集孔中。而標(biāo)準(zhǔn)的Atoll RoboColumn間距至少3mm,過大的間距,液滴滴落時(shí)噴濺,會(huì)造成樣品間交叉污染。




整個(gè)流程自動(dòng)化控制

利用計(jì)算機(jī)通過WinPREP操作軟件進(jìn)行編程控制整個(gè)純化實(shí)驗(yàn)過程,盡量減少人工干預(yù),自動(dòng)化實(shí)現(xiàn)預(yù)定的實(shí)驗(yàn)操作。編程過程簡潔明了,可操作性強(qiáng)。


基本流程如下:

1、根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?,選定收集完成操作所需的實(shí)驗(yàn)器材和試劑。

2、從WinPREP操作軟件實(shí)驗(yàn)器具庫中選擇相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)器具,拖拉放置到工作臺面上。

3、按需實(shí)現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)操作選擇相應(yīng)的移液模板,進(jìn)行編輯。

4、拖放連線實(shí)驗(yàn)器具,使之與對應(yīng)的操作步驟中各個(gè)操作流程匹配。

5、在實(shí)物儀器工作臺面上,組裝放置相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)器材和試劑,核對實(shí)物放置的板位和操作軟件程序中設(shè)定的板位,確保準(zhǔn)確無確保準(zhǔn)確無誤后,點(diǎn)擊軟件運(yùn)行按鈕,即可自動(dòng)化實(shí)現(xiàn)預(yù)定的純化實(shí)驗(yàn)過程。







根據(jù)通量和容量需求選擇 JANUS G3 BioTx ProJANUS G3 BioTx Pro Plus。







JANUS G3高通量小規(guī)模蛋白純化工作站是作為直觀、靈活和自動(dòng)化的設(shè)備開發(fā)的,能夠執(zhí)行并行大量蛋白樣本純化。除了在抗體藥領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,近來也在逐步助力AAV以及mRNA的純化應(yīng)用。


后期將為大家?guī)鞪ANUS G3與AKTA Explorer的平行比較,敬請期待!


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