RPMI 1640培養(yǎng)基最初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計(jì)的,現(xiàn)被發(fā)現(xiàn)適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞,包括 HeLa 細(xì)胞、Jurkat 細(xì)胞、 MCF-7 細(xì)胞、PC12 細(xì)胞、PBMC 細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和癌細(xì)胞等。那么你知道該如何配置1640培養(yǎng)基嗎?讓我們一起來看看吧!
一、材料
1. 1640培養(yǎng)基粉末
2. 純水
3. 無菌量筒或燒杯
4. pH試紙或pH計(jì)
5. 無菌培養(yǎng)瓶或離心管
6. 無菌濾器
二、步驟
1. 準(zhǔn)備工作區(qū)域:確保實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面清潔,并使用消毒劑將臺(tái)面消毒。
2. 洗手:che底洗手,并戴上實(shí)驗(yàn)手套。
3. 準(zhǔn)備無菌器具:將無菌培養(yǎng)瓶或離心管、無菌濾器放入高壓滅菌器中,按照廠商說明進(jìn)行高壓滅菌。
4. 準(zhǔn)備1640培養(yǎng)基:根據(jù)需求量,稱取適量的1640培養(yǎng)基粉末,放入無菌量筒或燒杯中。
5. 加入純水:使用純水,緩慢加入1640培養(yǎng)基粉末中,同時(shí)攪拌,直到溶解wan全,形成均勻的液體。
6. 調(diào)節(jié)pH值:使用pH試紙或pH計(jì),檢測(cè)培養(yǎng)基的pH值。如果需要調(diào)節(jié)pH值,可以加入少量的NaHCO3或NaOH(用于提高pH)或HCl(用于降低pH),并逐漸調(diào)節(jié)至目標(biāo)pH值。
7. 過濾培養(yǎng)基:將調(diào)節(jié)好pH值的培養(yǎng)基通過無菌濾器過濾,以去除其中的微生物和雜質(zhì)。
8. 分裝培養(yǎng)基:將過濾好的培養(yǎng)基分裝到已經(jīng)高壓滅菌的無菌培養(yǎng)瓶或離心管中,每個(gè)容器裝滿后緊密封閉。
9. 高壓滅菌:將分裝好的培養(yǎng)基放入高壓滅菌器中,按照廠商說明進(jìn)行高壓滅菌,以確保培養(yǎng)基的無菌性。
10. 存儲(chǔ):將高壓滅菌后的培養(yǎng)基存放在冰箱中,以防止其變質(zhì)。
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