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1.所有凍干培養(yǎng)基、保護(hù)劑以及容器等均需高溫高壓滅菌。高壓滅菌前，在試管內(nèi)貼上印有培養(yǎng)物標(biāo)識的紙標(biāo)簽?；蛘撸褂脦o菌帽的試管。
2.取一環(huán)分離后所得到的細(xì)菌菌液或者是甘油保存的菌液，在細(xì)菌培養(yǎng)板上分區(qū)或者使用蛇形劃板，37℃倒置培養(yǎng)并過夜。
3.取一只干凈并且進(jìn)行高溫高壓滅菌后的試管，倒入大約10ml的細(xì)菌培養(yǎng)液（大腸桿菌用磅培養(yǎng)液），從過夜培養(yǎng)后的培養(yǎng)平板中取一個(gè)單菌落至該培養(yǎng)液中后，在37℃溫度條件下振蕩培養(yǎng)過夜。
4.取10支清洗干凈且進(jìn)行滅菌處理后的西林瓶，每個(gè)西林瓶中加入 1ml的凍干保護(hù)劑，后加入過夜培養(yǎng)后的1ml 菌液，蓋上無菌橡膠塞，備注：需要保留出氣孔，并做好標(biāo)記后，存放于-80℃冰箱冷凍存儲(chǔ)。
5.細(xì)菌凍干機(jī)預(yù)熱約30分鐘后，迅速將已冷凍的菌液放在細(xì)菌凍干機(jī)上，打印幾小時(shí)至十幾小時(shí)不等細(xì)菌已凍干。
6.凍干后關(guān)閉凍干機(jī)，取出已經(jīng)凍干好的細(xì)菌，壓蓋密封，存儲(chǔ)在 -80℃條件下超低溫冰箱保存，可存放數(shù)年。
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