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細(xì)胞活力檢測方法大盤點,CTG法放大招?

來源:上海瑋馳儀器有限公司   2023年12月20日 15:28  

一,常用的細(xì)胞活力檢測試劑主要有 MTT、CCK8、CTG發(fā)光法 等檢測方法

MTT法:又稱 MTT 比色法。其檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為不溶于水的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜 (Formazan) 并沉積在細(xì)胞中,但死細(xì)胞無此功能,后經(jīng) DMSO 溶解,于 490 nm 處測定吸光值便可間接反應(yīng)細(xì)胞活力。但該方法除去操作步驟耗時以外,生成的 Formazan 是不溶于水的,需經(jīng) DMSO 溶解后才能檢測,增加了工作量的同時仍不能保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性,且該溶劑對人體具有明顯毒性。

CCK8法:相較于 MTT,無論是操作步驟還是檢測時間都優(yōu)化了很多。CCK8 是一種基于 WST-8 而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度、無放射性的比色檢測方法(可看往期推文 CCK-8,讓細(xì)胞活性檢測 So Easy!)。但在實驗時,一直有個問題讓人很困擾——“細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺”,但這個顏色深淺的標(biāo)準(zhǔn)我 “標(biāo)” 不出來怎么辦?痛點!痛點!痛點

CTG 發(fā)光法:基于高靈敏度生物發(fā)光檢測技術(shù),通過對三磷酸腺苷 (ATP) 進(jìn)行定量以測定培養(yǎng)物中活細(xì)胞數(shù)目及細(xì)胞活力。該實驗方法可用三個字簡單概括 “快、準(zhǔn)、狠”,比 MTT 的處理速度快近 20 倍,節(jié)省時間近 4 小時。CTG 的均質(zhì)檢測法即 “加樣-混樣-檢測”,使用時,只需將本試劑等體積添加至培養(yǎng)細(xì)胞中即可進(jìn)行檢測。不用感慨,細(xì)胞活力檢測為什么不能如此簡單?



二, MTT、CCK8 與 CTG 法特點比較



三,CTG適用于哪些實驗?

首先,來了解實驗 CTG 發(fā)光法的測定原理:ATP 作為細(xì)胞新陳代謝的一個重要指標(biāo),與活細(xì)胞數(shù)目呈良好的線性關(guān)系,是細(xì)胞活力檢測的重要標(biāo)志性分子。
ATP 生物發(fā)光的原理為:熒光素酶以熒光素、ATP 和 O2 為底物,在 Mg2+ 存在時,可將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能;在熒光素酶催化的發(fā)光反應(yīng)中,ATP 在一定的濃度范圍內(nèi),其濃度與發(fā)光強度呈線性關(guān)系,即在光信號與酶反應(yīng)體系中,發(fā)光值與 ATP 呈正比,ATP 與活細(xì)胞數(shù)成正比,CTG 發(fā)光法通過 ATP 含量來進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)或活力測定,且不受化合物自發(fā)熒光的影響 (圖 2),是細(xì)胞增殖測定,細(xì)胞活力測定和細(xì)胞毒性高通量篩選分析的理想選擇。




四,逐典細(xì)胞活力檢測試劑盒優(yōu)勢

1. 簡單快速:試劑盒的檢測過程一步到位,只需進(jìn)行“加樣-混合-讀數(shù)”操作,大大縮短了檢測時間(15 min 內(nèi)可以完成檢測)。

2. 靈敏度高:線性范圍寬,檢測窗口更大,低至10個數(shù)量的細(xì)胞即可進(jìn)行檢測。

3. 發(fā)光信號持久:半衰期長達(dá)3-5小時,更好滿足高通量篩選需求。

4. 凍融穩(wěn)定性好:經(jīng)過反復(fù)10次凍融處理,信號穩(wěn)定性不受影響。

Tips:小編溫馨提示,不建議頻繁凍融哦!

5. 性價比高:我們的試劑盒,在價格方面也表現(xiàn)出明顯的競爭力。這意味著您可以用更少的成本獲得高質(zhì)量的細(xì)胞活力數(shù)據(jù),降本增效。

五,產(chǎn)品數(shù)據(jù)

1.Luminescent Cell Viability Detection Kit細(xì)胞活力檢測試劑盒凍融穩(wěn)定性



2.Luminescent Cell Viability Detection Kit細(xì)胞活力檢測試劑盒及競品與細(xì)胞數(shù)呈線性




3.Luminescent Cell Viability Detection Kit細(xì)胞活力檢測試劑盒及競品半衰期




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