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有哪些技術(shù)可以在細胞中直接檢測RNA?

來源:紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司   2023年12月28日 10:51  

可以直接用于細胞中檢測RNA的實驗技術(shù)有很多,這些技術(shù)也各有優(yōu)缺點,應(yīng)根據(jù)具體的研究需求選擇最合適的技術(shù):

  • RNA熒光原位雜交技術(shù)技術(shù)(RNA-FISH)的原理基于探針與靶序列的特異性結(jié)合。首先,研究人員會設(shè)計出與目標RNA序列互補的熒光探針。這些探針在雜交緩沖液中與細胞中的目標RNA結(jié)合,形成探針-靶RNA復(fù)合物。然后,通過洗滌步驟去除未結(jié)合的探針,最后用熒光顯微鏡觀察雜交信號的位置和數(shù)量。RNA-FISH的實驗流程包括樣品制備、雜交、洗滌及分析等步驟。首先,研究人員需要準備樣品,這通常涉及將組織或細胞固定在載玻片上,并進行適當?shù)念A(yù)處理以暴露出RNA。然后,將探針與樣品雜交,這一步驟需要控制溫度和濕度以確保探針與目標RNA的有效結(jié)合。接下來是洗滌步驟,目的是去除未結(jié)合的探針,最后對樣品進行熒光顯微鏡觀察和分析。

  • 聚合酶鏈反應(yīng)(PCR):這是一種高通量、高靈敏、可重復(fù)性高的分子生物學技術(shù),可以快速精確檢測感興趣的基因片段,用于檢測基因的有無以及變異的存在。

  • Northern Blotting:這是一種傳統(tǒng)的RNA分析方法,可用于檢測特定RNA分子的大小和豐度。它可用于確定已知基因的轉(zhuǎn)錄起始位點、轉(zhuǎn)錄結(jié)束位點以及轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的處理情況。

  • 反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR):這是一種常用的RNA定量方法,它首先通過反轉(zhuǎn)錄將RNA轉(zhuǎn)化為cDNA,然后使用PCR進行擴增。RT-PCR可以用于檢測和定量特定基因的表達水平。

  • 核糖體展示(Ribosome Display):這是一種用于篩選蛋白質(zhì)的方法,通過將目標蛋白質(zhì)與核糖體結(jié)合,然后進行翻譯和展示。該技術(shù)可以用于篩選具有特定功能的蛋白質(zhì)或檢測細胞中表達的特定RNA。

  • 細胞內(nèi)原位雜交(In Situ Hybridization):這是一種用于檢測細胞內(nèi)特定RNA的技術(shù),通過使用標記的探針與目標RNA雜交,然后通過顯微鏡觀察雜交信號的位置和數(shù)量。


紅榮微再專注于分子診斷領(lǐng)域,早期技術(shù)團隊包含多名國內(nèi)大學生物與遺傳學科博士,從多樣本核酸提取保存技術(shù)、自主研發(fā)緩沖體系、抑制非特異性擴增技術(shù)逐步完成了紅榮微再PCR實驗方案,實現(xiàn)PCR擴增效率以及檢測靈敏度的重大突破,也奠定了紅榮微再以技術(shù)為根本,客戶為導(dǎo)向的研發(fā)模式,建立以創(chuàng)新為驅(qū)動的技術(shù)發(fā)展平臺。

2019年以來,經(jīng)歷社會、市場的多種變化革新,紅榮微再公司內(nèi)部也應(yīng)運完成組織架構(gòu)更新與產(chǎn)業(yè)布局的調(diào)整。公司確立“RNA、NGS、ctDNA、qPCR”四大方向并齊發(fā)展模式,技術(shù)部門新設(shè)NIPT、伴隨診斷、腫瘤早篩、傳染病監(jiān)測、實驗自動化設(shè)備等相關(guān)團隊,組織海外留學博士、高新技術(shù)企業(yè)核心骨干完成新產(chǎn)品線的研發(fā)工作,面對快速增長的市場下游需求,紅榮微再已初步完成多線產(chǎn)品的核心研發(fā)與標準化生產(chǎn),主要包括核酸提取試劑盒、qPCR試劑盒、測序試劑盒以及分子診斷類產(chǎn)品的基礎(chǔ)儀器耗材等多個類別。


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