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LPS的穩(wěn)定性和化學分解

來源:科德角國際生物醫(yī)學科技(北京)有限公司   2024年01月10日 15:12  

熱穩(wěn)定性

LPS(lipopolysaccharide,脂多糖)中性溶液在室溫放置數(shù)月,其生物學活性不發(fā)生明顯的改變4℃或低溫冰箱中,其生物學活性可保持數(shù)年至數(shù)十年。冷凍干燥的LPS中性粉劑,在室溫或冰箱條件下可放置幾十年或更長時間而不失去其生物學活性。

細菌LPS具有很強的耐熱性,一般的高壓滅菌不能使其滅活,115℃ 30 min的濕熱僅能破壞25%左右的內(nèi)毒素活性。內(nèi)毒素在50%相對濕度下可被環(huán)氧乙烷去除活性。當LPS的水溶液在不同溫度下處理時,發(fā)現(xiàn)在200℃ 1h仍能檢測出內(nèi)毒素活性,而進一步加熱到250℃ 3045min,180℃ 3~4h則活性完-全消失。我國2000年版藥典內(nèi)毒素檢查法規(guī)定,玻璃器皿的熱原處理為250℃干烤1h以上。

酸堿穩(wěn)定性

室溫條件下LPS在酸性溶液中可發(fā)生部分降解,這主要由核心多糖與Lipid A間糖苷鍵的裂解引起,在加熱的條件下這一反應(yīng)可加速。在0.1N醋酸中,100℃, 45min可使LPS失去90%的生物活性。在加熱條件下﹐強酸溶液可使LPS分子徹-底破壞。50%的枸櫞酸pH 1.0可水解 Lipid A 的磷酸基團或羥基脂肪酸等活性基團。堿性因素主要導(dǎo)致Lipid A骨架上連接的磷酸酯鍵及脂肪酸酯鍵水解使Lipid A 結(jié)構(gòu)受到破壞,從而導(dǎo)致LPS分子失去活性。故LPS宜在中性﹑低溫的條件下保存。

輻照對LPS的影響

長時間48h、大劑量的Co60照射后,LPS的結(jié)構(gòu)可以被完-全破壞。如有條件對不能用干烤處理的實驗器具,可用長時間大劑量的輻照清除LPS。

氧化劑對LPS活性的影響

過氧化氫是一種強氧化劑,具有防腐、滅菌除臭及清潔等作用。它分解后能釋放大量新生態(tài)氧可氧化分解LPS。過氧化氫主要裂解LPSLipid A還原端C1位的磷酸基團。產(chǎn)生的單磷酸LPS使其毒性下降,實驗證明,單磷酸的Lipid A毒性明顯弱于野生型的Lipid A,這與過氧化氫降解LPS后毒性下降結(jié)果相符。

試劑檢測常用氧化消毒劑對大腸桿菌內(nèi)毒素的滅活作用,結(jié)果顯示,氯石灰溶液5000mg/L有效氯20℃作用30min、氯胺T溶液5000mg/L有效氯20℃作用70min可滅活95%以上的LPS活性。在60℃加熱條件下,氯胺T滅活同量內(nèi)毒素僅需40min0.2%酸性高-錳-酸-鉀作用2min、1.0%中性高-錳-酸-鉀作用160min可滅活95%以上的LPS。

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