抗熒光淬滅封片劑是一種水溶性、非熒光性化合物,用來對(duì)最后一步染色為水溶液體系的玻片樣本進(jìn)行封片,可以明顯降低熒光顯微鏡下玻片樣本分析中的熒光淬滅現(xiàn)象。Fluoromount-G 產(chǎn)生半封固性,從而延長玻片樣本在 2-8℃的保存周期。本封片劑適用于細(xì)胞涂片/爬片和組織切片的封片,與免疫熒光、免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫組化等實(shí)驗(yàn)兼容。
抗熒光淬滅封片劑以 1×儲(chǔ)存液的形式提供,室溫穩(wěn)定保存。直接滴加一滴到樣本上,蓋上蓋玻片即可,使用非常方便。
(1)根據(jù)已建立體系制備細(xì)胞離心涂片。
(2)固定和再水化細(xì)胞涂片,用 PBS 緩沖液,重復(fù)操作 3 次。
(3)從水溶性緩沖液中取出一片玻片,直接滴加一滴 Fluoromount-G,蓋上蓋玻片,用無紡紗布輕輕按壓蓋玻片以去除多余分封片劑和封固蓋玻片。
(4)室溫下避光晾干封片劑至少 5min,再進(jìn)行普通熒光顯微鏡或者共聚焦顯微檢測。
(5)若樣本需長久保存,使用指甲油對(duì)蓋玻片四周進(jìn)行密封。
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