纖維連接蛋白是一種廣泛存在的天然細胞粘附因子,以二聚體形式存在于血漿中,并以多聚體形式存在于細胞外基質和細胞表面。纖維連接蛋白是一種糖蛋白,在兩個二硫鍵連接的220-250 kD亞基上發(fā)現(xiàn)。纖維連接蛋白用于促進各種細胞的附著和粘附。除了其細胞附著功能外,纖維連接蛋白還可能與膠原蛋白、肝素和其他細胞表面糖胺聚糖發(fā)生相互作用。Advanced BioMatrix的人源纖維連接蛋白濃度為0.5 mg/ml,每1.0 mg纖維連接蛋白溶解在2.0 ml的0.45M NaCl、20mM Tris-HCl和12%甘油中。纖維連接蛋白是通過Ruoslahti等人(1)的方法從人類血漿中純化,使用凝膠親和柱進行滅菌處理,通過0.2µ過濾器過濾。
艾美捷人纖維連接蛋白溶液,0.5 mg/ml,1 mg #ABM-5050-1MG應用領域:
纖維連接蛋白可用作薄涂層。不同細胞類型的合適附著和培養(yǎng)濃度可能有所不同??赡苄枰M行一些實驗來確定各個細胞培養(yǎng)系統(tǒng)的最佳條件。纖維連接蛋白不適用于人類。
人纖維連接蛋白溶液特性描述:
來源:人類血漿
純度:纖維連接蛋白的純度>95%,基于7% SDS-PAGE的考馬斯亮藍染色。
濃度:纖維連接蛋白的濃度為0.5 mg/ml,每1.0 mg纖維連接蛋白溶解在2.0 ml緩沖液中。
(1) Ruoslahti, E., E.G. Hayman M. Pierschbacher, and E.Engvall (1982) Fibronectin: Purification, immunochemicalproperties, and biological activities. Meth. Enzymol. 82 Pt A:803-831.
細胞附著活性:24孔板在PBS中(每孔0.3毫升)中涂覆纖維連接蛋白,于37°C孵育過夜。經(jīng)BSA阻斷后,TIG-3細胞(JCRB 0506)(每孔5 X 104細胞/1 ml DMEM)被加入,并在37°C孵育90分鐘。附著的細胞通過庫侖計數(shù)器進行計數(shù)。
pH:纖維連接蛋白溶解在pH約為7的緩沖液中。
儲存:建議將纖維連接蛋白存放在-20°C以下,并避免重復凍結和解凍。
人纖維連接蛋白溶液使用說明:
請按照以下建議作為指南,確定您培養(yǎng)系統(tǒng)的合適的涂層條件。
1. 解凍纖維連接蛋白,并使用無血清培養(yǎng)基或PBS(不含Ca++,Mg++)稀釋至所需濃度。最終溶液應該足夠稀釋,使添加的體積能夠均勻覆蓋表面。
2. 向培養(yǎng)表面添加適量稀釋后的材料。
3. 在室溫孵育約1小時。
4. 吸去剩余材料。
5. 用雙蒸餾水仔細沖洗培養(yǎng)皿,避免刮傷底部表面。
6. 培養(yǎng)皿已經(jīng)可以使用。如果保持無菌性,它們也可以在2-8°C潮濕存放或風干。
注意事項:用于生產(chǎn)本產(chǎn)品的人源原料已經(jīng)檢測為乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒(HCV)、人類免疫缺陷病毒1型(HIV-1)和2型(HIV-2)以及梅毒均為陰性。請像處理潛在傳染源一樣小心處理。
艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質的產(chǎn)品與服務。
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