皖儀科技液相色譜配置示差檢測(cè)器測(cè)試食品里多種糖類物質(zhì)

摘要：本篇文章參考了GB5009.8-2016標(biāo)準(zhǔn)，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置示差檢測(cè)器測(cè)試果糖、葡萄糖、麥芽糖等糖類物質(zhì)。

        皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀

1 前言

糖類是自然界中最多的有機(jī)化合物，是食品中重要的風(fēng)味成分和營(yíng)養(yǎng)成分，其種類和含量是評(píng)價(jià)食品品質(zhì)的重要質(zhì)量指標(biāo)。在食品加工工藝中，糖類對(duì)改變食品的形態(tài)、組織結(jié)構(gòu)、物化性質(zhì)以及色、香、味等感官指標(biāo)起著十分重要的作用。因此，準(zhǔn)確測(cè)定食品中各種糖的含量對(duì)食品品質(zhì)改良、加工儲(chǔ)藏技術(shù)選擇、新產(chǎn)品開(kāi)發(fā)等都具有重要意義。

隨著檢測(cè)技術(shù)的蓬勃發(fā)展，越來(lái)越多的檢測(cè)手段被運(yùn)用到糖類檢測(cè)中，而高效液相色譜法因其高效、高靈敏度、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛用于產(chǎn)品中多種糖含量的測(cè)定。

2 方法原理

高效液相色譜—示差檢測(cè)器測(cè)定，外標(biāo)法定量。

3 儀器配置及實(shí)驗(yàn)方法

3.1 儀器配置

       表1 皖儀科技液相配置清單表

3.2 實(shí)驗(yàn)方法

3.2.1 試劑和標(biāo)準(zhǔn)品制備

         表2 試劑及標(biāo)準(zhǔn)品清單

3.2.1.1 糖標(biāo)準(zhǔn)貯備液:分別稱取經(jīng)過(guò)96℃±2℃干燥2h的果糖、葡萄糖、麥芽糖各適量,用流動(dòng)相定容于50mL,置于4℃密封可貯藏一個(gè)月。

3.2.1.2 果糖標(biāo)準(zhǔn)使用液:分別吸取果糖標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量,分別用流動(dòng)相稀釋為濃度6.8mg/L、34mg/L、68mg/L、340mg/L、680mg/L濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

3.2.1.3 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)使用液:分別吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量,分別用流動(dòng)相稀釋為濃度64mg/L、320mg/L、640mg/L、3200mg/L、6400mg/L濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

3.2.1.4 麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)使用液:分別吸取麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量,分別用流動(dòng)相稀釋為濃度9mg/L、45mg/L、90mg/L、450mg/L、900mg/L濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

3.2.2 色譜條件表3 色譜條件

3.3 樣品前處理

稱取糖漿樣品適量于50mL容量瓶,加流動(dòng)相（注意:因?yàn)槭静顧z測(cè)器原理是利用溶液的折射率不同進(jìn)行檢測(cè)，所以示差檢測(cè)器對(duì)溶液非常敏感。在樣品及標(biāo)準(zhǔn)品配制時(shí)需用流動(dòng)相配制，洗針液也用流動(dòng)相。且做實(shí)驗(yàn)之前流動(dòng)相要預(yù)混。）定容至50mL,充分搖勻,用干燥濾紙過(guò)濾,棄去初濾液,后續(xù)濾液用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾或離心獲取上清液過(guò)0.45μm微孔濾膜至樣品瓶,供液相色譜分析。

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.1 線性

          圖1果糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

          圖2葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

          圖3麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

說(shuō)明：由上圖可知，果糖、葡萄糖、麥芽糖的曲線方程與R值分別為：y=13108x-0.1398，R值：0.99978y=0.10211x-3.15229，R值：0.99997y=0.05504x-0.54839，R值：0.99994，完全滿足實(shí)驗(yàn)要求。

4.2 重復(fù)性

4.2.1 果糖重復(fù)性

          圖4果糖重復(fù)性譜圖

         表4 果糖重復(fù)性數(shù)據(jù)

4.2.2 葡萄糖重復(fù)性

         圖5葡萄糖重復(fù)性譜圖

         表5 葡萄糖重復(fù)性數(shù)據(jù)

4.2.3 麥芽糖重復(fù)性

          圖6麥芽糖重復(fù)性譜圖

          表6 麥芽糖重復(fù)性數(shù)據(jù)

說(shuō)明：根據(jù)以上表格數(shù)據(jù)可知，果糖、葡萄糖、麥芽糖的保留時(shí)間RSD分別為：0.209%、0.052%、0.213%。峰面積RSD分為：0.886%、0.389%、0.983%。重復(fù)性良好。滿足一般實(shí)驗(yàn)要求。

4.3某品牌糖漿測(cè)試結(jié)果

         圖7混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試譜圖

          圖8糖漿-1實(shí)驗(yàn)譜圖

     圖9糖漿-2實(shí)驗(yàn)譜圖表7樣品實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) 

說(shuō)明：樣品的峰型良好，分離度均大于1.6以上，滿足標(biāo)準(zhǔn)要求1.5。且經(jīng)計(jì)算，果糖、葡萄糖、麥芽糖兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值占其算數(shù)平均值的結(jié)果分別為6.6%、7.9%、7.7%。滿足標(biāo)準(zhǔn)要求的10%。

5 總結(jié)

本篇介紹的分析方法，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置示差檢測(cè)器測(cè)試果糖、葡萄糖、麥芽糖等糖類物質(zhì)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，果糖、葡萄糖、麥芽糖線性良好，R值均在0.999以上，保留時(shí)間RSD分別為0.209%、0.052%、0.213%，峰面積RSD分為0.886%、0.389%、0.983%，重復(fù)性良好，滿足一般實(shí)驗(yàn)要求。樣品測(cè)試的峰型良好，分離度均大于1.6以上，滿足標(biāo)準(zhǔn)要求1.5。且經(jīng)計(jì)算，果糖、葡萄糖、麥芽糖兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值占其算數(shù)平均值的結(jié)果分別為6.6%、7.9%、7.7%，滿足標(biāo)準(zhǔn)要求的10%。說(shuō)明皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀滿足測(cè)試果糖、葡萄糖、麥芽糖等糖類物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)要求。