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三生有幸,舶來(lái)品韶華流光里,俯仰皆是Absin

來(lái)源:愛(ài)必信(上海)生物科技有限公司   2024年04月18日 09:35  

隨著愛(ài)必信的發(fā)展與完善,我們的產(chǎn)品受到越來(lái)越多的老師信賴,今天帶大家解讀一篇滿眼都是愛(ài)必信的文章。


文獻(xiàn)信息


題目:Regulation of the migration of colorectal cancer stem cells via the TLR4/MyD88 signaling pathway by the novel surface marker CD14 following LPS stimulation

雜志:Oncology Letters 27.2 (2024): 60.

作者:Li Y, Shi J, Liu Z, et al


三生有幸,舶來(lái)品韶華流光里,俯仰皆是Absin

圖 文獻(xiàn)引用產(chǎn)品信息


研究背景


結(jié)直腸癌(CRC)是全球癌癥相關(guān)死亡的主要原因之一,主要原因與CRC干細(xì)胞(CCSCs)引起的術(shù)后癌癥復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移或癌細(xì)胞耐藥有關(guān),CCSCs缺乏一致和可靠的標(biāo)記物限制了它們?cè)谂R床實(shí)踐中的使用。為了啟動(dòng)促炎反應(yīng),脂多糖(LPS)和CD14(單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的一種特殊表面標(biāo)志物)通過(guò)Toll樣受體4(TLR4)信號(hào)通路相互作用,此外,脂多糖通過(guò)TLR4信號(hào)通路促進(jìn)結(jié)直腸癌的發(fā)展和轉(zhuǎn)移,CD14與腫瘤的復(fù)發(fā)、生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移和治療耐藥有關(guān),這與CSC的特征(如復(fù)發(fā)、生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移和耐藥)是一致的,這表明CD14可能與CCSCs相關(guān)。


研究方法


本研究采用免疫熒光雙標(biāo)記法檢測(cè)CD133和CD14,定量評(píng)估結(jié)直腸癌組織和癌旁組織石蠟包埋切片CCSCs中CD14的表達(dá)。隨后,從結(jié)直腸癌組織中提取CD14+細(xì)胞,通過(guò)分析增殖、腫瘤親和性和治療耐藥性來(lái)檢測(cè)其干性特征,以證實(shí)表型鑒定。此外,遷移的體外檢測(cè)能夠檢測(cè)CD14的功能。


研究結(jié)果


1、癌旁組織相比,所有結(jié)直腸癌組織中CD14和CD133共表達(dá)的陽(yáng)性率均顯著升高。


三生有幸,舶來(lái)品韶華流光里,俯仰皆是Absin

圖 CD14在CD133標(biāo)記的結(jié)直腸csc中表達(dá)


2、EdU和CCK-8檢測(cè)結(jié)果顯示結(jié)腸癌CD14+細(xì)胞表現(xiàn)出強(qiáng)的增殖能力。


三生有幸,舶來(lái)品韶華流光里,俯仰皆是Absin

圖 結(jié)腸癌CD14+細(xì)胞表現(xiàn)出增強(qiáng)的增殖能力

(CCK-8購(gòu)自愛(ài)必信abs50003 CCK-8試劑盒)


3、細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)表明,與CD14-細(xì)胞相比,CD14+細(xì)胞更大,核分裂增加,聚集成簇。用裸鼠異種移植實(shí)驗(yàn)表明植入45天后,CD14+細(xì)胞組的腫瘤明顯大于CD14-細(xì)胞組


三生有幸,舶來(lái)品韶華流光里,俯仰皆是Absin

圖 CD14+細(xì)胞在結(jié)腸癌中具有致瘤性


4、耐藥性分析。CD14+組和CD14-組細(xì)胞的IC50分別為2.554和17.02mg/L,表明與陰性組相比,陽(yáng)性組的耐藥性增加。


三生有幸,舶來(lái)品韶華流光里,俯仰皆是Absin

圖 CCK-8測(cè)定5-FU對(duì)CD14+和CD14-細(xì)胞48h的IC50效應(yīng)曲線


5、Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,內(nèi)毒素組表現(xiàn)出更強(qiáng)的遷移能力,而內(nèi)毒素+中和抗體組的遷移能力比對(duì)照組更強(qiáng)(圖A)。創(chuàng)面愈合實(shí)驗(yàn)表明,內(nèi)毒素組的細(xì)胞遷移能力明顯高于內(nèi)毒素+中和抗體組(圖B)。RT-qPCR結(jié)果顯示MyD88基因表達(dá)水平以內(nèi)毒素組最高(圖C),Western blotting顯示TLR4和MyD88蛋白的表達(dá)在內(nèi)毒素+中和抗體組和內(nèi)毒素組均顯著高于對(duì)照組,其中內(nèi)毒素組的增加更明顯(圖D)。

三生有幸,舶來(lái)品韶華流光里,俯仰皆是Absin

三生有幸,舶來(lái)品韶華流光里,俯仰皆是Absin

圖 內(nèi)毒素影響細(xì)胞遷移

(RIPA裂解液abs9229、彩色PAGE快速凝膠試劑盒(10%)abs9367、ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒abs920、 TLR4抗體abs132000、MyD88抗體abs135682、LPSabs47014848, 細(xì)胞快速RNA提取試劑盒 abs60027)

常規(guī)裂解液對(duì)比


品名

RIPA裂解液(弱)

RIPA裂解液(中)

RIPA裂解液(強(qiáng))

貨號(hào)-規(guī)格

abs9230-100mL

abs9228-100mL

abs9229-100mL

成分表

50mM Tris-HC(pH7.4)

50mM Tris-HC(pH7.4)

50mM Tris-HC(pH7.4)

150mM NaCl

150mM NaCl

150mM NaCl

1%NP-40

1%NP-40

1%Triton X-100

0.25% 脫氧膽酸鈉

0.5% 脫氧膽酸鈉

1% 脫氧膽酸鈉


0.1% SDS

0.1% SDS

以及正釩酸鈉,氟化鈉,EDTA和抑肽酶等多種抑制劑

以及正釩酸鈉,氟化鈉,EDTA和抑肽酶等多種抑制劑

以及正釩酸鈉,氟化鈉,EDTA和抑肽酶等多種抑制劑

特點(diǎn)

不含高濃度去垢劑

有較高濃度的去垢劑,不適合用Bradford法來(lái)測(cè)定總蛋白濃度

有較高濃度的去垢劑,不適合用Bradford法來(lái)測(cè)定總蛋白濃度

裂解強(qiáng)度

溫和

強(qiáng)

膜蛋白

一般

較好

很好

胞漿蛋白

很好

很好

很好

核蛋白

較好

較好

很好

應(yīng)用推薦

WB,IP,Co-IP

WB,IP

WB,IP,Co-IP





本期好物推薦


類(lèi)別

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

樣本處理

abs9346

細(xì)胞漿、細(xì)胞核及細(xì)胞膜蛋白抽提試劑盒

50T

abs9116

免疫印跡及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液

100mL

abs9162

廣譜型磷酸酶抑制劑混合物(100×儲(chǔ)液)

1mL

abs9161

廣譜型蛋白酶抑制劑混合物(不含EDTA,100×DMSO儲(chǔ)液)

1mL

蛋白定量

abs9232

BCA蛋白定量試劑盒

500T

配膠試劑盒、Glass gel預(yù)制膠、Plastic gel預(yù)制膠、abs93系列預(yù)制膠

上樣與電泳

abs953

上樣緩沖液(2×)

10mL

abs9829

上樣緩沖液(5×)

10mL

abs951

電泳液(10×)

100mL

abs923

預(yù)染蛋白Marker(10-245kDa)

500uL

轉(zhuǎn)膜

abs932

PVDF膜(0.45μm)

20張

abs960

NC膜(0.45μm)

20張

abs950

電轉(zhuǎn)液(10×)

100mL

封閉

abs9175

脫脂奶粉

500g

abs9157

牛血清白蛋白

100g

抗體稀釋與去除

abs954

WB專用一抗二抗稀釋液

100mL

abs967

Western一抗二抗去除液(強(qiáng)堿性)

500mL

顯色與檢測(cè)

abs920

ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒

25mL×2






Absin產(chǎn)品線:
爆款產(chǎn)品:試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測(cè)、殘留檢測(cè)、多因子檢測(cè));細(xì)胞培養(yǎng)(類(lèi)器官試劑盒+基質(zhì)膠,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細(xì)胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...
特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...


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