永生小鼠雪旺細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物（S100，GFAP，p75NTR）；參與施旺細(xì)胞發(fā)育和外周髓鞘形成的轉(zhuǎn)錄因子（Krox2、Oct6、PAX3和SOX10）；和神經(jīng)營養(yǎng)因子（NGF、BDNF、GDNF和CNTF）。

在生長因子如PDGF-BB、aFGF、bFGF或TGF-β1存在的情況下，這些細(xì)胞表現(xiàn)出有絲分裂反應(yīng)。IMS32細(xì)胞可用于研究參與外周神經(jīng)再生的作用機(jī)制，并作為評估神經(jīng)疾病發(fā)病機(jī)制的體外模型。用于檢測細(xì)胞標(biāo)志物的免疫反應(yīng)性。

艾美捷abm永生化小鼠雪旺細(xì)胞基本參數(shù)：

貨號：T0295

名稱：永生化小鼠施萬細(xì)胞（IMS32）

生物體：小鼠（M. musculus）

組織：大腦

供體歷史：ICR 小鼠

生長特性：貼壁，紡錘形

細(xì)胞類型：永生化細(xì)胞

儲存條件：液氮的氣相，或低于-130°C。

運(yùn)輸條件：干冰運(yùn)輸。

產(chǎn)品格式：冷凍

預(yù)期用途：本產(chǎn)品僅用于實(shí)驗(yàn)室研究。不適用于任何動物或人類的治療用途，任何人類或動物的消費(fèi)，或任何診斷用途。

生物安全等級：II

生長條件：

建議使用 PriCoat™ T25 燒瓶（G299）或應(yīng)用細(xì)胞外基質(zhì)（G422）以促進(jìn)細(xì)胞對培養(yǎng)容器的粘附。PriGrow III (TM003) + 10% FBS + 1% 青霉素/鏈霉素溶液（G255），37.0°C，5% CO?。

冷凍保存：

使用冷凍保存培養(yǎng)基(TM024)，或含有10% DMSO的wan全生長培養(yǎng)基進(jìn)行冷凍保存。

細(xì)胞播種密度（每平方厘米細(xì)胞數(shù)）：50,000 - 60,000

細(xì)胞群倍增時間（小時）：45 - 55

永生化方法：自然永生化

表達(dá)：

表達(dá)膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物（S100, GFAP, p75NTR）、參與施萬細(xì)胞發(fā)育和周圍髓鞘形成過程中的轉(zhuǎn)錄因子（Krox20, Oct6, PAX3, 和 SOX10），以及神經(jīng)營養(yǎng)因子（NGF, BDNF, GDNF, 和 CNTF）。

材料引用：

如果使用此材料導(dǎo)致科學(xué)出版物的發(fā)表，請按照以下方式引用材料：Applied Biological Materials Inc, 目錄編號 T0295。

拆包和儲存指南：

1. 目視檢查包裝容器是否有泄漏或破損的跡象。

2. 立即將冷凍細(xì)胞從干冰包裝中轉(zhuǎn)移到-130°C以下的溫度中，最好在液氮?dú)庀鄡Υ嬷校钡綔?zhǔn)備使用。

為了確保最高的活性水平，在收到后盡快解凍小瓶并開始培養(yǎng)。如果需要繼續(xù)儲存，小瓶應(yīng)僅儲存在-130°C以下或液氮?dú)庀嘀?。不要?span style="font-family: Calibri;">-70°C儲存，因?yàn)檫@會導(dǎo)致活性喪失。

解凍程序：

1. 在37°C水浴中快速解凍細(xì)胞，同時輕輕搖晃（最多2分鐘）。小瓶蓋應(yīng)保持在水面以上，以最小化污染風(fēng)險。

2. 用70%乙醇噴灑并擦拭小瓶外部以消毒。從這一點(diǎn)開始，所有操作都應(yīng)嚴(yán)格在生物安全柜內(nèi)使用無菌條件進(jìn)行。

3. 將細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移到含有5ml預(yù)熱的wan全生長培養(yǎng)基的15ml無菌圓錐管中。以125xg離心細(xì)胞5-7分鐘。

4. 在不干擾細(xì)胞沉淀物的情況下吸去上清液。將細(xì)胞沉淀物重新懸浮在推薦的預(yù)熱的wan全生長培養(yǎng)基中，并分裝到T25培養(yǎng)瓶中。

5. 在推薦的條件下培養(yǎng)細(xì)胞。

傳代程序：

下面給出的體積是針對T75瓶的；根據(jù)培養(yǎng)容器的大小按比例增加或減少體積。當(dāng)培養(yǎng)容器80%充滿時傳代細(xì)胞。

1. 吸去培養(yǎng)基，并加入2-3ml預(yù)熱的0.25% Trypsin-EDTA到培養(yǎng)容器中。

2. 在顯微鏡下觀察細(xì)胞以確認(rèn)脫落（通常在2-10分鐘內(nèi)）。難以脫落的細(xì)胞可以放在37°C下，幾分鐘以促進(jìn)脫落。

3. 通過向培養(yǎng)容器中加入相等體積的wan全生長培養(yǎng)基來中和Trypsin-EDTA。

4. 將培養(yǎng)懸浮液轉(zhuǎn)移到無菌離心管中，并以125xg離心5分鐘。實(shí)際的離心持續(xù)時間和速度可能因細(xì)胞類型而異。

5. 吸去上清液，并用預(yù)熱的新鮮wan全生長培養(yǎng)基重新懸浮沉淀物。根據(jù)需要將適量的細(xì)胞懸浮液添加到新的培養(yǎng)容器中。

6. 在推薦的條件下培養(yǎng)細(xì)胞。

永生化小鼠雪旺細(xì)胞文獻(xiàn)參考：

Watabe, K., Fukuda, T., Tanaka, J., Honda, H., Toyohara, K., & Sakai, O. (1995). Spontaneously immortalized adult mouse Schwann cells secrete autocrine and paracrine growth-promoting activities. Journal of neuroscience research, 41(2), 279–290.