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柱后衍生法在豆豉腐乳等發(fā)酵食品中黃曲霉毒素檢測(cè)的應(yīng)用
柱后衍生法在豆豉腐乳等發(fā)酵食品中黃曲霉毒素檢測(cè)的應(yīng)用
針對(duì)豆豉、腐乳基質(zhì)可能存在難凈化、雜質(zhì)多的特點(diǎn)，普瑞邦技術(shù)工程師根據(jù)《GB 5009.22-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中黃曲霉毒素B族G族的測(cè)定》中半流體樣品實(shí)驗(yàn)方法及參考文獻(xiàn)，進(jìn)行了免疫親和柱與多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化對(duì)比驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，具體實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下：
【標(biāo)準(zhǔn)品】黃曲霉毒素混合標(biāo)準(zhǔn)工作液：1ug/mL
【樣品處理】
樣品 | 豆豉（a）腐乳（b） | |||
編號(hào) | a1（b1） | a2（b2) | a3（b3) | a4(b4) |
處理過(guò)程 | 20mL70%甲醇水 | 20mL84%乙腈水 | ||
超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩 20min | ||||
超速離心10min，上清液備用 | ||||
取提取液4mL過(guò)M160固相凈化柱 | / | 取提取液4mL過(guò)M160固相凈化柱 | / | |
取2mL過(guò)柱后液體加18mL水稀釋 | 取提取液2mL加18mL水稀釋 | 取2mL過(guò)柱后液體加18mL水稀釋 | 取提取液2mL加18mL水稀釋 | |
全部過(guò)普瑞邦免疫親和柱，最終2mL甲醇定容上機(jī) | ||||
加標(biāo)水平 | 5mg/L | |||
液相譜圖如下：
b1:腐乳70%甲醇提取過(guò)多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化
b2:腐乳70%甲醇提取只過(guò)免疫親和柱凈化
b3:腐乳84%乙腈提取過(guò)多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化
b4:腐乳84%乙腈提取只過(guò)免疫親和柱凈化
a1:豆豉70%甲醇提取過(guò)多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化
a2:豆豉70%甲醇提取只過(guò)免疫親和柱凈化
a3:豆豉84%乙腈提取過(guò)多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化
a4:豆豉84%乙腈提取只過(guò)免疫親和柱凈化
【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】
通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，按照以上前處理流程，84%乙腈或70%甲醇提取后，過(guò)免疫親和柱就能達(dá)到凈化效果，但是70%甲醇提取腐乳、豆豉兩種基質(zhì)回收率偏低，建議實(shí)驗(yàn)過(guò)程為84%乙腈提取后過(guò)免疫親和柱凈化。
【液相條件】
流動(dòng)相：甲醇：水 = 45:55
色譜柱：Pribolab真菌毒素檢測(cè)專用柱（C18，250×4.6 mm，5 μm）
流速：1.0 mL/min
進(jìn)樣量：10 μL
光化學(xué)柱后衍生器：Pribolab® KRC
激發(fā)波長(zhǎng)：360 nm，發(fā)射波長(zhǎng)：440 nm。
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