1．主要試劑
（1）羊抗人C4抗血清：按說明書所示單擴(kuò)效價擴(kuò)大2—4倍稀釋，或分別用含不同濃度抗體的瓊脂糖凝膠澆板，選擇峰高、清晰度適當(dāng)?shù)目贵w濃度為zui適工作濃度。
（2）羊抗人B因子抗血清：按說明書所示單擴(kuò)效價擴(kuò)大3—5倍稀釋，也可按選擇C4抗血清稀釋濃度的方法確定zui適工作濃度。
（3）電泳緩沖液：稱取10．30g巴比妥鈉，1．83g巴比妥，溶于1 000mL蒸餾水中。此液為pH8．6，離子強度0．05的巴比妥緩沖液。
（4）凝膠緩沖液：以定量測定時用1：4稀釋的電泳緩沖液，B因子定量時1：5稀釋。
（5）染色液：0．25％考馬斯亮藍(lán)，稱取0．25g考馬斯亮藍(lán)R-250，溶于100mL脫色液中。
（6）脫色液：甲醇900mL、冰醋酸200mL、蒸餾水900mL。

2．操作步驟
（1）1％瓊脂糖凝膠板的制備：稱取0．50g瓊脂糖和1z聚乙二醇（PEG 6 000）置100mL三角燒瓶中，加入50mL凝膠緩沖液，隔水煮沸至瓊脂糖*溶解，55℃保溫；加入適量的抗C4血清或抗B因子血清（預(yù)先實驗選定）混勻，澆板，凝膠厚度lmm。沿陰約2cm處打孔，孔間距6～8mm，孔徑3—3．5mm。
（2）待測樣本用凝膠緩沖液1：10稀釋，參考血清對倍稀釋（一般作5個稀釋度），每孔加5～I(xiàn)Oul。
（3）將樣本孔端接負(fù)極，電壓12。5V／cra電泳5ho
（4）取出凝膠板，用生理鹽水漂洗2次，去離子水漂洗1次。
（5）將干凈濾紙鋪在凝膠板上，干燥、常規(guī)染色、脫色。
（6）結(jié)果計算：量取各火箭峰的高度，根據(jù)峰高—濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線計算待測樣本中C4或Bf含量。