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inspiralis————拓?fù)洚悩?gòu)酶蛋白質(zhì)印跡法

來源:北京和一生物科技有限公司   2024年05月30日 19:06  

進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)時(shí),必須優(yōu)化一抗和二抗的量以減少背景并確保獲得足夠的信號。我們的促旋酶多克隆抗體和單克隆抗體已經(jīng)過測試,可以減少進(jìn)一步優(yōu)化的需要。*

如果已加入純蛋白,則應(yīng)將一抗稀釋 1:1,000;如果加入細(xì)胞裂解物,則應(yīng)將一抗稀釋 1:200。稀釋液通常在洗滌緩沖液(1X TBS、0.1% Tween 20、1% 脫脂奶粉)中進(jìn)行,每片印跡 20 ml,孵育 1 小時(shí)。用洗滌緩沖液洗滌以去除一抗后,將二抗以 1:5,000 的稀釋度加入洗滌緩沖液中(多克隆抗體為抗兔抗體,單克隆抗體為抗鼠抗體)。

然后可以使用標(biāo)準(zhǔn)比色法或化學(xué)發(fā)光法對印跡進(jìn)行可視化。

* 優(yōu)化條件適用于 SDS-PAGE 微型凝膠,其中每條泳道中裝有 1 µg 蛋白質(zhì)樣品(純化蛋白質(zhì)或細(xì)胞提取物),凝膠在印跡前在標(biāo)準(zhǔn) SDS-PAGE 條件下運(yùn)行(43 kDa 蛋白質(zhì) 200 mA 運(yùn)行 45 分鐘或 90 kDa 或 97 kDa 蛋白質(zhì) 200 mA 運(yùn)行 60 分鐘)。

 


北京和一生物科技有限公司專業(yè)代理inspiralis全系列產(chǎn)品,專營進(jìn)口生物試劑,科學(xué)儀器,實(shí)驗(yàn)消耗品,化工原料及藥物中間體等。公司與諸多國外品牌簽下代理,sigmasanta、RD、Abcam、CSTtoxin、streckBiolegend、ebioscience、saracare、polyplus、BeyotimeNovus、moltox等,能為廣大科研用戶提供數(shù)萬種試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)消耗品。

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