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上海索寶梯度PCR儀應用原理等介紹

來源:上海索寶生物科技有限公司   2024年06月28日 17:16  
  上海索寶梯度PCR儀的原理基于PCR反應的溫度敏感性。 PCR反應是一種體外擴增DNA的技術,通過不斷重復三個步驟(變性、退火和延伸),可以在短時間內擴增目標DNA序列。 而PCR反應的成功與否,很大程度上取決于反應體系中的溫度。 梯度PCR儀通過在反應管中創(chuàng)建溫度梯度,使得不同溫度下的反應條件同時存在。
 
  一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。 因為被擴增的不同的DNA片段其適合的退火溫度不同,通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的適合退火溫度進行有效的擴增。
 
  由于傳統(tǒng)的普通PCR儀一次只能運行一個特定的退火溫度,因此如果要設置不同的退火溫度,那么就需要多次運行才能夠實現,這一過程需要花費大量的時間。 而梯度PCR儀以此就可以實現多個不同的退火溫度,這樣可以節(jié)約時間,在效率的提升方面就非常明顯了,這樣既節(jié)約時間,也節(jié)約成本。 因此從功能和特性上來說,梯度PCR儀的性能是要優(yōu)于普通PCR儀,而且在不設置梯度的情況下梯度PCR儀也可當做普通的PCR用,非常方便。
 
  可以把一次PCR擴增實驗設置成一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度)的實驗,這樣的儀器就叫梯度PCR儀。 設置梯度的主要原因是因為被擴增的不同DNA片段,其最適退火溫度不同,通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR反應就可以篩選出表達量最高的最適退火溫度,優(yōu)化實驗,進行有效的擴增。 梯度PCR儀主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,在節(jié)約成本的同時也節(jié)約了時間。
 

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