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做色譜分析的小伙伴們都知道，反相色譜（RP-HPLC）是應(yīng)用最為廣泛的一種分離模式，它可以分析從低極性到中高極性的多數(shù)化合物，常用的鍵合相類(lèi)型有C18、C8和苯基等。然而，反相色譜也有它的一個(gè)使用局限性：就是一些大極性化合物在常規(guī)反相中保留較弱，從而無(wú)法進(jìn)行后續(xù)的定性與定量分析。
對(duì)此我們?cè)摬扇∈裁礃拥霓k法呢？
首先，最容易想到的是通過(guò)增加流動(dòng)相中水相的比例以減弱洗脫強(qiáng)度，從而增加極性化合物的保留。一般來(lái)說(shuō)，分析物的極性越大，流動(dòng)相中水的比例也需要更高。那么問(wèn)題來(lái)了，對(duì)于一些常規(guī)的C18柱在高比例乃至純水相中耐受不好，很容易發(fā)生孔內(nèi)干涸，也就是我們常說(shuō)的“疏水塌陷”。一旦發(fā)生很容易出現(xiàn)色譜柱保留減弱等問(wèn)題。
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