近期，巴黎薩克雷大學(xué)發(fā)表在《Neuro-Oncology》中的一篇文章^[1]，便利用Incucyte® 對患者來源的膠質(zhì)干細胞（GSCs）的侵襲行為進行了研究。

彌漫性中線膠質(zhì)瘤（DMG）是小兒膠質(zhì)瘤，可以向中樞神經(jīng)系統(tǒng)CNS侵潤，為控制病情會對患者進行放療，但其仍會向CNS轉(zhuǎn)移，確診后兩年生存率極低。文章采用患者來源的膠質(zhì)干細胞（GSCs）體外3D培養(yǎng)，來研究其侵襲的機制。體外GSCs細胞腫瘤球侵襲檢測結(jié)果，與患者DMG轉(zhuǎn)移進程一樣，存在兩種轉(zhuǎn)移模式：間充質(zhì)樣和阿米巴樣，后者的侵襲轉(zhuǎn)移能力更強。對患者樣本的轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)果表明阿米巴樣侵襲轉(zhuǎn)移增強與骨形態(tài)發(fā)生蛋白BMP7的過表達有關(guān)，BMP7過表達后細胞骨骼肌收縮增強、黏附降低，最終使細胞的侵襲運動能力變強。

在96孔超低吸附U底板內(nèi)接種GSCs細胞，培養(yǎng)兩天后成球，將腫瘤球包埋在基質(zhì)膠里，利用Incucyte® 的腫瘤球模塊實時監(jiān)測球體的侵襲。

研究發(fā)現(xiàn)基因敲除BMP7后GSCs細胞向基質(zhì)膠內(nèi)侵襲的面積減小，腫瘤球侵襲能力變?nèi)酰▓D1E-1H）。同時，將GSCs細胞接種到Incucyte® Clearview 96板的上室，在下室加入生長因子進行實時的趨化檢測，發(fā)現(xiàn)上室加入重組的BMP7后發(fā)生趨化的細胞增加，如同時加入pan-Alk的抑制劑LDN193189，則BMP7誘導(dǎo)的GCSs細胞趨化增強也被抑制（圖1I-1J）。

圖2結(jié)果顯示，BMP7與細胞表面的BMPR受體結(jié)合后會激活下游的MEK1/2、ERK1/2和ROCK激酶信號通路，使它們成為抑制DMG侵襲轉(zhuǎn)移的靶點。腫瘤球侵襲監(jiān)測結(jié)果證明BMPR受體抑制劑LDN193189、MEK1/2抑制劑U0126/Trametinib、ERK1/2抑制劑FR180204/Ulixertinib和ROCK抑制劑Y27632抑制GSCs腫瘤球侵襲（圖2C-2D）。

Incucyte® 腫瘤球侵襲和趨化檢測結(jié)果與DMG患者轉(zhuǎn)移病程一致，文章提到，可以根據(jù)患者樣本在這兩個體外侵襲模型中的結(jié)果對患者進行分級，從而調(diào)整臨床放療策略。Incucyte® 應(yīng)用廣、通量高和培養(yǎng)箱內(nèi)自動實時監(jiān)測的特點，可以顯著減少人為操作、提高實驗效率。文章里有很多導(dǎo)出的圖片，直觀地展示了不同組、不同時間點細胞侵襲的差異，跟實時的定量曲線結(jié)果相互驗證，使結(jié)果更可信。