UbcH5c（也稱為泛素結(jié)合酶E2 D3，UBE2D3）是UbcH5蛋白家族的E2結(jié)合泛素蛋白。E2結(jié)合泛素蛋白以ATP依賴的方式從E1接收泛素并將其轉(zhuǎn)移到E3。UbcH5c調(diào)節(jié)核因子κB（NF-κB）和p53腫瘤抑制因子等轉(zhuǎn)錄因子的泛素化，從而參與風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）和癌癥等疾病。UbcH5c的小分子抑制劑具有其他p53表達(dá)水平和活性，因此是癌癥治療中有前途的候選治療藥物。

UbcH5c TR-FRET檢測試劑盒是一種均勻、靈敏的TR-FRET（時間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移）檢測試劑盒，旨在測量UbcH5b（泛素結(jié)合酶E2 D3）泛素化活性。該試劑盒使用生物素標(biāo)記的泛素和鋱標(biāo)記的抗體識別His標(biāo)記的UbcH5c蛋白，以完成TR-FRET配對。該試劑盒包含足夠的純化的UbcH5 c、純化的UBE1、生物素泛素、抗His-Tb標(biāo)記的供體、染料標(biāo)記的受體和400個反應(yīng)的測定緩沖液。

圖1:UbcH5c TR-FRET檢測試劑盒示意圖。

鋱標(biāo)記的抗His抗體結(jié)合His標(biāo)記的E2結(jié)合蛋白，而染料標(biāo)記的鏈霉抗生物素蛋白受體結(jié)合生物素泛素。當(dāng)泛素轉(zhuǎn)移到E2酶時，復(fù)合物形成，TR-FRET信號使用能夠測量時間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移的熒光板讀數(shù)器進(jìn)行測量。TR-FRET信號與UbcH5c活性成正比

艾美捷UBCH 5c TR-FRET檢測試劑盒：

貨號: BPS-79901

檢測試劑盒格式: TR-FRET

物種: 人類

需自備材料:

能夠測量時間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移（TR-FRET）的熒光微孔板閱讀器

可調(diào)節(jié)的微量移液管和無菌吸頭

軌道搖床

UniProt #UBE1: P22314; UBCH5c: P61077

儲存/穩(wěn)定性: 如果按照指示儲存材料，該檢測試劑盒從收到之日起最佳性能可維持長達(dá)6個月。

應(yīng)用: 篩選抑制Ubch5c活性的分子，在藥物發(fā)現(xiàn)高通量篩選（HTS）應(yīng)用中。

運輸溫度: -80°C

禁忌: UbcH5c TR-FRET檢測試劑盒與高達(dá)1%最終DMSO濃度兼容。我們建議在U2檢測緩沖液中以不超過10% DMSO溶液準(zhǔn)備抑制劑，并每個孔使用2 μl。

避免凍融循環(huán)。

文獻(xiàn)參考：

1. Saville, M.K., et al., J. Biol. Chem. 2004; 279(40): 42169-81.

2. Kim, J.-H., et al., BMB Rep. 2015; 48(1): 25-29.

相關(guān)產(chǎn)品：

UbcH5c, His-Tag (Human) Recombinant

UbcH5a (UBE2D1), His-tag Recombinant

UBCH13 TR-FRET Assay Kit

UBCH5b TR-FRET Assay Kit

UBCH5a TR-FRET Assay Kit