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細(xì)胞周期檢測
應(yīng)用簡介
細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期：即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）。某些細(xì)胞在分裂結(jié)束后暫時離開細(xì)胞周期，停止細(xì)胞分裂，執(zhí)行一定生物學(xué)功能（G0期）。由于細(xì)胞周期各時相的DNA含量不同，通常正常細(xì)胞的G1/ G0期具有二倍體細(xì)胞的DNA含量（2N），而G2/ M期具有四倍體細(xì)胞的DNA含量（4N）,而S期的DNA含量介于二倍體和四倍體之間。
技術(shù)原理
PI可以與DNA結(jié)合，其熒光強度直接反映了細(xì)胞內(nèi)DNA含量。因此，通過流式細(xì)胞儀PI染色法對細(xì)胞內(nèi)DNA含量進(jìn)行檢測時，可以將細(xì)胞周期各時相區(qū)分為G1/G0期，S期和G2/M期。
實驗方法
細(xì)胞周期檢測時，一定不要洗滌。不同于蛋白染料和細(xì)胞之間的牢固結(jié)合，DNA與染料的結(jié)合是一種結(jié)合態(tài)和游離態(tài)之間松散的平衡，不是很牢固，所以洗滌步驟會造成染料丟失，降低核酸的特異性熒光，造成測量值變小。
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