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CHIP 檢測(cè)科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹
CHIP 檢測(cè)
應(yīng)用簡(jiǎn)介
核酸和蛋白質(zhì)是組成生命的主要生物大分子，兩者的相互作用是構(gòu)成生命活動(dòng)的生長(zhǎng)、繁殖、運(yùn)動(dòng)、遺傳和代謝等生命活動(dòng)的基礎(chǔ)。研究蛋白質(zhì)和核酸間的相互作用是人們探索生命現(xiàn)象奧秘的關(guān)鍵，CHIP檢測(cè)實(shí)驗(yàn)是應(yīng)用于蛋白與核酸互作關(guān)系的重要參考。
技術(shù)原理
CHIP實(shí)驗(yàn)在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合物，并將其隨機(jī)切斷為一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段，通過對(duì)目的片斷的純化與檢測(cè)，從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。
實(shí)驗(yàn)方法
1、細(xì)胞樣本所需數(shù)量較大，需要提前按照所需細(xì)胞的要求整理，保證細(xì)胞所需量達(dá)到要求。
2、染色質(zhì)消化過程需要調(diào)整，以獲得更好的消化時(shí)間，需要進(jìn)行相關(guān)梯度摸索。
3、不同細(xì)胞的處理時(shí)間和細(xì)胞數(shù)目會(huì)有差異，需要進(jìn)行調(diào)整。
4、部分抗體級(jí)別可能達(dá)不到CHIP級(jí)別的要求，需要采購(gòu)對(duì)應(yīng)級(jí)別的抗體并通過陰陽(yáng)性實(shí)驗(yàn)反饋結(jié)果可信性。部分特異染色質(zhì)檢測(cè)靶序列可能無(wú)法在一次擴(kuò)增中獲得較好的結(jié)果，需要不斷調(diào)整引物。
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