手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
一．實(shí)驗(yàn)器材：
1． 器材：
40孔塑料板、40孔板離心機(jī)、微量加樣器、振蕩器、蓋玻片、熒光顯微鏡等。
2． 試劑：
單抗隆抗體（單抗）、熒光標(biāo)記抗鼠免疫球蛋白、PBS（pH7.2-7.4）、甘油、疊氮鈉（NaN3）等。
二．方法（微量法）
1． 將分離好的單個(gè)核細(xì)胞用PBS洗2次，1000rpm每次10分鐘。用含0.1% NaN3 PBS調(diào)細(xì)胞濃度在0.5-1×108/ml（5000萬(wàn)-1億/ml），加在40孔板上，每孔10ul，含5-10×105細(xì)胞，然后加入單抗（*抗 體）50ul（同時(shí)加入AB型血清5ul）振蕩混勻，置4℃，至少30分鐘。
2． 用含0.1%NaN3的PBS洗一次，1000rpm離心3-5分鐘棄上清。
3． 加熒光標(biāo)記抗鼠抗體（第二抗體）工作液20ul，混勻振蕩置4℃/30分鐘（時(shí)間不能超過(guò)）。
4． 用含0.1%NaN3的PBS洗2次，方法同上，棄上清，加入含60%甘油的PBS5-10ul（依據(jù)所加細(xì)胞量而定）振蕩均勻，點(diǎn)片，并加蓋玻片。
如想次日看結(jié)果可在第三步后每孔加入1%多聚甲醛PBS每孔50ul，混勻置4℃過(guò)夜，次日離心棄上清按四步做法觀察結(jié)果（為膜熒光）。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購(gòu)中心