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安捷倫蛋白質(zhì)組學(xué)樣品制備 — MARS 多重親和去除系統(tǒng)

來源:安捷倫科技(中國)有限公司   2024年12月04日 10:23  

樣本的復(fù)雜程度和蛋白質(zhì)濃度的大跨度動態(tài)范圍一直是蛋白質(zhì)組學(xué)研究面臨的最大挑戰(zhàn),如何減少蛋白樣品的復(fù)雜程度,降低動態(tài)范圍,進而增加下一步分析的靈敏度和分辨率就成為蛋白質(zhì)組學(xué)流程中樣品前處理的最重要步驟。

 

比如在血液中,蛋白質(zhì)的豐度差異巨大,跨度可達 12 個數(shù)量級,其中高豐度蛋白如白蛋白、免疫球蛋白 IgG 和 IgA、纖維蛋白原、轉(zhuǎn)鐵蛋白等占比極高,可達 97-99%。然而,質(zhì)譜技術(shù)在檢測中存在傾向性,更易識別相對豐度較高的蛋白質(zhì)信號,這使得低豐度蛋白——往往是疾病特異性標(biāo)志物——的檢測變得困難。為了提升對這些關(guān)鍵低豐度蛋白的檢測能力,研究者們正致力于開發(fā)預(yù)處理技術(shù),以降低高豐度蛋白的影響,從而揭示那些在疾病診斷和治療中具有重要意義的低豐度生物標(biāo)志物。這一策略對于提高疾病診斷的準(zhǔn)確性和深度具有重大意義。

 

安捷倫 MARS 多重親和去除系統(tǒng),可用于鑒定和表征血清、血漿和其它生理體液中發(fā)現(xiàn)的高價值、低豐度蛋白和生物標(biāo)志物。 Mars 多重親和去除系統(tǒng)可重復(fù)而特異性地去除人生理體液中的 14、7 或 6 種高豐度蛋白,以及鼠生理體液中的 3 種高豐度蛋白 (詳細見如下列表)。

 


多重親和去除系統(tǒng)選擇指南

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Agilent MARS 多重親和去除系統(tǒng)的優(yōu)點

高通量處理能力和靈敏度

可一次性去除 14 種、7 種、6 種、2 種或 1 種高豐度蛋白質(zhì),多達蛋白總量的 94%-99%。從而將檢出蛋白標(biāo)志物的靈敏度提高至 ng/ml 水平。

高容效性和特異性

特異性抗體與層析介質(zhì)的空間靶向性共價結(jié)合以及優(yōu)化的結(jié)合洗脫體系保證了最大限度的結(jié)合能力與特定高豐度蛋白的去除。

高重現(xiàn)性和利用率

可利用率高,多達 200 次以上的高效重復(fù)使用,大大節(jié)省單次實驗的成本。

多選擇性

產(chǎn)品規(guī)格靈活,適合不同實驗室的需求,可提供 HPLC 色譜柱和離心小柱 2 種形式和多種規(guī)格。

強兼容性

與大多數(shù)液相色譜儀器(色譜柱)或臺式離心機(離心小柱)完全兼容、實現(xiàn)無縫銜接式分析,或者分離樣品可以直接用于 2D、LC/MS 或其它分析技術(shù)的下一步分析。

 

 

 

 

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圖示結(jié)果為同一色譜柱 1、100、150、200 次的分離去除效果的疊加比對結(jié)果,說明 MARS 色譜柱的分離去除的高重現(xiàn)性和利用率

為了保證液相色譜柱和離心小柱的最佳表現(xiàn),安捷倫提供了使用 Mars 多重親和去除系統(tǒng)液相色譜柱所需要的所有消耗品和附件,以保證色譜柱壽命和樣品重復(fù)性最大化的優(yōu)化條件。

該試劑盒為 4.6 x 50 mm 液相色譜柱處理約 200 份樣品,用 4.6 x 100 mm LC 柱處理約 100 份樣品,和 200 個離心小柱所用的緩沖液 A 和緩沖液 B。

特殊配方的緩沖液 A 和上樣緩沖液可最大限度地減少蛋白質(zhì)之間的相互作用,以避免由于低豐度蛋白與高豐度蛋白的結(jié)合而導(dǎo)致的不必要的流失。

特殊配方的緩沖液 B,洗脫緩沖液用來破壞抗體-蛋白之間的相互作用,便于將高豐度蛋白從柱子上洗脫下來,從而提高色譜柱的使用效率。

 

 

MARS 多重親和去除系統(tǒng)配套附件與試劑盒


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