瑞孚迪GPCR藥物高通量篩選整體解決方案

由于GPCR的復(fù)雜性和多樣性，在進(jìn)行GPCR藥物高通量篩選時(shí)，需要對(duì)候選藥物進(jìn)行大量的驗(yàn)證和優(yōu)化，以確保其對(duì)于下游信號(hào)通路的精細(xì)調(diào)控。

瑞孚迪 (Revvity) 基于均相免洗ELISA技術(shù)平臺(tái)，提供G蛋白信號(hào)通路（如cAMP、IP-1等）和 β - arrestin 蛋白信號(hào)通路相關(guān)檢測(cè)試劑，讓您快速、準(zhǔn)確地進(jìn)行GPCR藥物的高通量篩選。

技術(shù)原理

瑞孚迪HTRF和AlphaLISA均相檢測(cè)技術(shù)，也稱為“免洗ELISA”技術(shù)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中無(wú)需洗板，只需“加樣-孵育-讀板”，2 h即可獲得結(jié)果，技術(shù)原理如圖1所示。

G蛋白信號(hào)通路

G 蛋白是三聚體 GTP - 結(jié)合調(diào)節(jié)蛋白的簡(jiǎn)稱，由 α、β、γ 三個(gè)亞基組成。在未激活狀態(tài)下，α 亞基結(jié)合 GDP，整個(gè) G 蛋白處于非活性狀態(tài)。當(dāng) GPCR 被激活后，它可以促使 G 蛋白的 α 亞基與 GDP 解離，并與 GTP 結(jié)合。GTP 結(jié)合的 Gα 亞基可以調(diào) 節(jié)腺苷酸環(huán)化酶（AC）的活性激活下游信號(hào)，Gαs 和 Gαi 亞型分別激活或滅活腺苷酸環(huán)化酶，將 ATP 轉(zhuǎn)換成 cAMP；Gαq 或 Gαo 等亞型激活磷酸肌醇磷脂酶 C 酶，將磷脂酰肌醇 4,5 - 雙磷酸酯水解為 DAG 和 IP3，IP3的半衰期很短，其產(chǎn)生后在磷酸酶的作用下生成IP2，然后生成IP1。

產(chǎn)品列表

β-arrestin Signaling

β-arrestin主要包括β-arrestin1和β-arrestin2，它在G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）信號(hào)通路的調(diào)節(jié)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。當(dāng)配體與 GPCR 結(jié)合并激活 GPCR 后，GPCR會(huì)發(fā)生構(gòu)象變化。隨后，G 蛋白偶聯(lián)受體激酶（GRK）會(huì)磷酸化激活后的 GPCR 的胞內(nèi)段，磷酸化后的GPCR為β-arrestin提供了結(jié)合位點(diǎn)，從而招募β-arrestin與之結(jié)合。β-arrestin與GPCR結(jié)合后，會(huì)進(jìn)一步發(fā)生構(gòu)象變化。這種變化使得β-arrestin能夠與其他信號(hào)分子相互作用，開(kāi)啟自身的信號(hào)通路。

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磷酸化途徑

在GPCR藥物研發(fā)過(guò)程中，外源性激動(dòng)劑會(huì)導(dǎo)致GPCR構(gòu)象變化，隨之胞內(nèi)GRK識(shí)別激活受體，細(xì)胞內(nèi)絲氨酸和蘇氨酸發(fā)生磷酸化。此外，第二信使調(diào)節(jié)的激酶也可以參與GPCR磷酸化，包括激酶A和C以及其他絲氨酸/蘇氨酸激酶。磷酸化還會(huì)增加GPCR與β-arrestin的相互作用，從而觸發(fā)第二波信號(hào)傳導(dǎo)。

推薦產(chǎn)品（部分）

GPCR結(jié)合實(shí)驗(yàn)

在藥物研發(fā)的早期階段，需要確定GPCR是否是一個(gè)有效的藥物靶點(diǎn)。通過(guò)結(jié)合實(shí)驗(yàn)，可以證實(shí)藥物是否能夠特異性地與目標(biāo)GPCR結(jié)合。結(jié)合實(shí)驗(yàn)還可以通過(guò)比較不同藥物與GPCR的結(jié)合親和力，篩選出最有潛力的候選藥物進(jìn)行進(jìn)一步的研發(fā)。

推薦產(chǎn)品