使用EVIDENT共聚焦顯微鏡對血管化腫瘤細胞球芯片進行觀察研究

來源：儀景通光學科技（上海）有限公司 2025年03月07日 09:26

研究顯示，腫瘤可通過誘導血管生長來支持其旺盛的活性。這些血管作為腫瘤的生命線，在腫瘤微環(huán)境（TME）中對于其活性起到了相當重要的作用。到目前為止，對腫瘤在生化和生物力學刺激的反應，大多是在靜態(tài)條件下進行評估，并沒有考慮到血流對腫瘤的影響。本篇文章，我們提供了一個腫瘤-芯片平臺，通過流經(jīng)可灌注血管網(wǎng)絡的介質流來評估腫瘤微環(huán)境，并測量血流中的給藥效應。

圖1.微流控設備和腫瘤模型。（左）微流控設備圖；（右）具有可灌注血管網(wǎng)絡的腫瘤模型。

腫瘤細胞球在微流控設備中的3D觀察結果

本研究中，我們在微流控設備中將人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）與含有人乳腺癌細胞（MCF-7）的腫瘤細胞球進行共同培養(yǎng)，以重現(xiàn)包括血管網(wǎng)絡在內的腫瘤微環(huán)境。為了確認微流控設備中血管網(wǎng)絡的可灌注性，我們使用FLUOVIEW共聚焦顯微鏡觀察熒光微球（綠色）是否能夠連續(xù)通過血管網(wǎng)絡和球細胞。因細胞球較厚，我們很難獲得培養(yǎng)樣本的三維圖像。通常需要較高的激發(fā)光強度才能產(chǎn)生足以能夠檢測到的熒光信號強度。

但是，較高的激發(fā)光強度也會增大光毒性，從而導致細胞損傷。為了解決這一問題，我們使用集成了TruSpectral全真光譜檢測技術和高靈敏度GaAsP探測器的FLUOVIEW共聚焦顯微鏡，捕獲微弱的熒光信號，同時盡量降低激光器的功率。

圖2.腫瘤細胞球及其血管網(wǎng)絡。細胞核：青色（405 nm，Hoechst 33342），RFP-HUVEC：紫紅色（561 nm，RFP），E-鈣粘蛋白：黃色（640 nm，Alexa Fluor 633）。

(a) 腫瘤細胞球的投影圖。比例尺：200 μm，物鏡：UPLSAPO10X2。（b）（a）中白色框架的3平面圖像（x-y、x-z、y-z）。比例尺：20 μm，物鏡：UPLSAPO40X2。

使用共振掃描振鏡進行血流快速成像

我們還利用熒光微球（綠色，直徑3.1 μm）檢查了腫瘤細胞球血管網(wǎng)絡內的血流。在觀察快速血流時，常規(guī)掃描振鏡的掃描速度可能不夠。本實驗中，我們使用配有高速共振掃描振鏡的FLUOVIEW共聚焦顯微鏡采集圖像。

結果表明，在將熒光微球注入到微流控設備的通道3時，微球流經(jīng)腫瘤細胞球的中空腔并到達通道1，說明我們所設計的血管網(wǎng)絡可接受灌注。確認人工腫瘤細胞球模型用于研究血流對TME影響的有效性后，我們在隨后的實驗中明確了，在包括血管網(wǎng)絡的TME中，藥物的療效因血管內是否存在血流而異。我們希望這款三維模型能夠在今后被用作經(jīng)血管給藥模型，以協(xié)助藥物的開發(fā)。

視頻：微流控設備上人造血管和腫瘤細胞球內熒光微球的流動。成像條件：65 毫秒/幀。比例尺：100 μm。

這項研究的新穎之處在于，在腫瘤細胞球內，人工構建的可灌注血管網(wǎng)絡?？梢暬芫W(wǎng)絡如何連接細胞球和微流控通道非常重要。此外，可以同時觀察血管管腔和流經(jīng)血管結構的血流，對于證明其可灌注性來說也很關鍵。FLUOVIEW共聚焦顯微鏡上安裝的高速共振掃描振鏡，能夠對血管網(wǎng)絡（RFP標記）和微球（綠色）動態(tài)流進行成像。

——Ryuji Yokokawa博士

日本京都大學微工程系

腫瘤學研究和藥物研發(fā)對顯微成像的要求非常高，需要有高速的三維成像能力，在體的研究還需要低光度性的深層成像，Evident全新激光掃描共聚焦顯微鏡和多光子顯微鏡FV4000（MPE）配備全新的高靈敏硅基半導體檢測器，具有更高的靈敏度，降低了光毒性，同時高分辨率的共振掃描振鏡可提供視頻級采集速率，幫助獲取腫瘤微環(huán)境或藥物代謝的動態(tài)變化過程。

左圖：FV4000激光掃描共聚焦顯微鏡；右圖：FV4000MPE多光子顯微鏡

相關產(chǎn)品

免責聲明

凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
本網(wǎng)轉載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關權利。

国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

使用EVIDENT共聚焦顯微鏡對血管化腫瘤細胞球芯片進行觀察研究

免責聲明

聯(lián)系我們

關注我們