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茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵微板法)

來源:上海尚寶生物科技有限公司   2025年03月17日 10:50  

茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵微板法)

產(chǎn)品貨號:BA1570

 

產(chǎn)品規(guī)格:100T

 

產(chǎn)品簡介:

茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱,包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,是一類兒茶素為主體的黃酮化合物,兒茶素占60~80%,具有C6-C3-C6碳骨架結(jié)構(gòu),是一種重要的天然抗氧化物質(zhì),能夠清除自由基。類物質(zhì)茶多酚又稱茶鞣或茶單寧,是形成茶葉色香味的主要成份之一,也是茶葉中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物質(zhì)具解毒和抗輻射作用,能有效地阻止放射性物質(zhì)侵入骨髓,并可使鍶90和鈷60迅速排出體外。

茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵微板法)檢測原理是以酒石酸鐵為底物,利用茶多酚與酒石酸鐵反應(yīng),生成穩(wěn)定紫藍色化合物,以酶標(biāo)儀540nm處測定吸光度,在一定范圍內(nèi)吸光度與顏色深淺的變化成正比,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較進而計算茶多酚含量,該試劑盒主要用于測定植物組織、血清等樣品中茶多酚含量,尤其適用于測定茶葉中茶多酚含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

 

產(chǎn)品組成:

產(chǎn)品名稱

100T

保存條件

試劑(A): 茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)

1ml

2-8℃,避光

試劑(B): TP Assay buffer

15ml

2-8

試劑(C): TP顯色液

5ml

2-8℃,避光

 

自備材料:

1. 茶葉、綠茶等待測樣本

2. 蒸餾水

3. 研缽、200目細胞篩

4. 離心管或試管

5. 水浴鍋或電爐

6. 離心機

7. 96孔板、酶標(biāo)儀

 

操作步驟(僅供參考)

1. 準(zhǔn)備樣品:

植物樣品:取0.2g植物組織,研磨成粉末,加入煮沸的蒸餾水10ml,沸水浴浸提20min,用200目細胞篩過濾,濾渣再繼續(xù)置于新的煮沸的10ml蒸餾水,相同操作提取一次,合并兩次濾液,5000r/min離心15min,取上清液,即為茶多酚提取液。4℃避光保存,用于茶多酚的檢測。綠茶等液體樣本可直接用本試劑盒測定。

血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可直接用本試劑盒測定。

細胞或組織樣品:取恰當(dāng)細胞或組織裂解液,如有必要可用蒸餾水進行適當(dāng)勻漿,5000r/min離心15min,取上清液,即為茶多酚提取液,4℃避光保存。

高濃度樣品:如果樣品中含有較濃度的茶多酚,可以使用蒸餾水進行適當(dāng)稀釋。

2. 配制系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn):用蒸餾水和茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml),按下表進行操作,依次稀釋。

加入物(μl)

1

2

3

4

5

6

茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)

2

5

10

30

50

80

蒸餾水

98

95

90

70

50

20

相當(dāng)于茶多酚含量(μg/ml)

20

50

100

300

500

800

3. TP加樣:取96孔板,按照下表設(shè)置空白孔、對照孔、測定孔,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的TP濃度過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設(shè)置2平行孔,求平均值。

加入物(μl)

空白孔

標(biāo)準(zhǔn)孔

測定孔

蒸餾水

50

25

25

系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1~6)

-

25

-

待測樣品

-

-

25

TP 顯色液

50

50

50

TP Assay buffer

150

150

150

4. TP測定:以空白調(diào)零,酶標(biāo)儀測定540nm處標(biāo)準(zhǔn)孔、測定孔的吸光度。

 

計算:

以系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn)濃度(1~6)(20、50、100300、500800μg/ml)為橫坐標(biāo),以對應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,求得回歸方程。以測定管吸光度代入回歸方程求得提取液中TP含量。

組織樣本TP含量(μg/g)= (C×V T )/(W×V S )

式中:C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)

VT =提取液的總體積(ml)

W=組織樣本的重量(g)

VS =測定時所用提取液的體積(ml)

 

液體樣本TP含量(μg/ml)= (C×VT )/ VS

式中:C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)

VT=提取液的總體積(ml)

VS=測定時所用提取液的體積(ml)

 

注意事項:

1. 提取茶多酚時,注意提前煮沸蒸餾水,以便充分提取。提取液宜4℃避光保存。

2. 提取時間過長,茶多酚會發(fā)生氧化反應(yīng),導(dǎo)致測定結(jié)果不準(zhǔn)確,建議2h內(nèi)測定完成。

3. 如果沒有分光光度計,也可以使用普通的酶標(biāo)儀測定,但應(yīng)注意酶標(biāo)儀最大檢測體積。

4. 每次檢測指標(biāo)不宜過多,否則操作時間不一,有可能導(dǎo)致樣本間的差異。

5. TP顯色液容易失效,建議4℃避光保存。

6. 采用分光光度計未調(diào)零情況下,空白參考值為0.102,100μg/ml參考值為0.265,一般情況下濃度在200~600μg/ml 時測定結(jié)果更準(zhǔn)確。由于儀器設(shè)備、操作方法等不同,參考值會有差異。

7. 該試劑盒測定范圍為10~1200μg/ml;以肉眼觀察,濃度小于100μg/ml 幾乎呈無色,濃度大于100μg/ml即可顯淡紫藍色,300μg/ml呈明顯的紫藍色。

 

有效期:3個月有效。4℃運輸,4℃保存。

茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵微板法)

產(chǎn)品貨號:BA1570

 

產(chǎn)品規(guī)格:100T

 

產(chǎn)品簡介:

茶多酚(Tea PolyphenolsTP)是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱,包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,是一類兒茶素為主體的黃酮化合物,兒茶素占60~80%,具有C6-C3-C6碳骨架結(jié)構(gòu),是一種重要的天然抗氧化物質(zhì),能夠清除自由基。類物質(zhì)茶多酚又稱茶鞣或茶單寧,是形成茶葉色香味的主要成份之一,也是茶葉中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物質(zhì)具解毒和抗輻射作用,能有效地阻止放射性物質(zhì)侵入骨髓,并可使鍶90和鈷60迅速排出體外。

茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵微板法)檢測原理是以酒石酸鐵為底物,利用茶多酚與酒石酸鐵反應(yīng),生成穩(wěn)定紫藍色化合物,以酶標(biāo)儀540nm處測定吸光度,在一定范圍內(nèi)吸光度與顏色深淺的變化成正比,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較進而計算茶多酚含量,該試劑盒主要用于測定植物組織、血清等樣品中茶多酚含量,尤其適用于測定茶葉中茶多酚含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

 

產(chǎn)品組成:

產(chǎn)品名稱

100T

保存條件

試劑(A): 茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)

1ml

2-8℃,避光

試劑(B): TP Assay buffer

15ml

2-8

試劑(C): TP顯色液

5ml

2-8℃,避光

 

自備材料:

1. 茶葉、綠茶等待測樣本

2. 蒸餾水

3. 研缽、200目細胞篩

4. 離心管或試管

5. 水浴鍋或電爐

6. 離心機

7. 96孔板、酶標(biāo)儀

 

操作步驟(僅供參考)

1. 準(zhǔn)備樣品:

植物樣品:取0.2g植物組織,研磨成粉末,加入煮沸的蒸餾水10ml,沸水浴浸提20min,用200目細胞篩過濾,濾渣再繼續(xù)置于新的煮沸的10ml蒸餾水,相同操作提取一次,合并兩次濾液,5000r/min離心15min,取上清液,即為茶多酚提取液。4℃避光保存,用于茶多酚的檢測。綠茶等液體樣本可直接用本試劑盒測定。

血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可直接用本試劑盒測定。

細胞或組織樣品:取恰當(dāng)細胞或組織裂解液,如有必要可用蒸餾水進行適當(dāng)勻漿,5000r/min離心15min,取上清液,即為茶多酚提取液,4℃避光保存。

高濃度樣品:如果樣品中含有較濃度的茶多酚,可以使用蒸餾水進行適當(dāng)稀釋。

2. 配制系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn):用蒸餾水和茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml),按下表進行操作,依次稀釋。

加入物(μl)

1

2

3

4

5

6

茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)

2

5

10

30

50

80

蒸餾水

98

95

90

70

50

20

相當(dāng)于茶多酚含量(μg/ml)

20

50

100

300

500

800

3. TP加樣:取96孔板,按照下表設(shè)置空白孔、對照孔、測定孔,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的TP濃度過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設(shè)置2平行孔,求平均值。

加入物(μl)

空白孔

標(biāo)準(zhǔn)孔

測定孔

蒸餾水

50

25

25

系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1~6)

-

25

-

待測樣品

-

-

25

TP 顯色液

50

50

50

TP Assay buffer

150

150

150

4. TP測定:以空白調(diào)零,酶標(biāo)儀測定540nm處標(biāo)準(zhǔn)孔、測定孔的吸光度。

 

計算:

以系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn)濃度(1~6)(20、50、100、300、500、800μg/ml)為橫坐標(biāo),以對應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,求得回歸方程。以測定管吸光度代入回歸方程求得提取液中TP含量。

組織樣本TP含量(μg/g)= (C×V T )/(W×V S )

式中:C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)

VT =提取液的總體積(ml)

W=組織樣本的重量(g)

VS =測定時所用提取液的體積(ml)

 

液體樣本TP含量(μg/ml)= (C×VT )/ VS

式中:C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)

VT=提取液的總體積(ml)

VS=測定時所用提取液的體積(ml)

 

注意事項:

1. 提取茶多酚時,注意提前煮沸蒸餾水,以便充分提取。提取液宜4℃避光保存。

2. 提取時間過長,茶多酚會發(fā)生氧化反應(yīng),導(dǎo)致測定結(jié)果不準(zhǔn)確,建議2h內(nèi)測定完成。

3. 如果沒有分光光度計,也可以使用普通的酶標(biāo)儀測定,但應(yīng)注意酶標(biāo)儀最大檢測體積。

4. 每次檢測指標(biāo)不宜過多,否則操作時間不一,有可能導(dǎo)致樣本間的差異。

5. TP顯色液容易失效,建議4℃避光保存。

6. 采用分光光度計未調(diào)零情況下,空白參考值為0.102,100μg/ml參考值為0.265,一般情況下濃度在200~600μg/ml 時測定結(jié)果更準(zhǔn)確。由于儀器設(shè)備、操作方法等不同,參考值會有差異。

7. 該試劑盒測定范圍為10~1200μg/ml;以肉眼觀察,濃度小于100μg/ml 幾乎呈無色,濃度大于100μg/ml即可顯淡紫藍色,300μg/ml呈明顯的紫藍色。

 

有效期:3個月有效。4℃運輸,4℃保存。


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