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低成本、高效率!T7 Endonuclease I 讓基因編輯檢測更經(jīng)濟

來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2025年04月16日 08:56  

 


隨著基因編輯技術(shù)的飛速發(fā)展,CRISPR-Cas9、TALEN、ZFN等工具已成為生命科學領(lǐng)域的核心利器。然而,基因編輯的成功與否,關(guān)鍵在于編輯效率的準確評估。如何快速、高效地檢測基因編輯的效率,成為了科研人員面臨的重要挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)的檢測方法如測序等雖然準確,但耗時長、成本高,難以滿足高通量篩選的需求。因此,開發(fā)一種快速、簡便的檢測方法成為了當務(wù)之急。在這一背景下,T7核酸內(nèi)切酶 I(T7 Endonuclease I)憑借其高靈敏度、快速反應(yīng)和操作簡便的特點,成為評估CRISPR-Cas9等基因編輯工具效率的理想選擇。

 

T7 Endonuclease I是一種來源于T7噬菌體的核酸酶,能夠識別并切割不全配對的DNA、十字形結(jié)構(gòu)DNA、Holliday結(jié)構(gòu)或交叉DNA、異源雙鏈DNA,也能以較慢速度切割帶切刻的雙鏈DNA,切割位點位于錯配堿基5′端的第一、第二或第三個磷酸二酯鍵。其應(yīng)用于基因編輯效率檢測的作用機制如下:當基因編輯后,目標位點會形成含有錯配堿基的DNA雙鏈(如插入、缺失或點突變),T7 Endonuclease I能夠識別這些錯配位點,并在其附近進行切割,產(chǎn)生特定長度的DNA片段。

 

圖1.T7 Endonuclease I結(jié)構(gòu)及作用過程示意圖[1]

 

基于T7 Endonuclease I在基因編輯效率檢測中的的重要地位,翌圣生物隆重推出純度高、切割活性強的T7 Endonuclease I (Cat#14548),為您的基因編輯研究提供更高效、更穩(wěn)定的工具。

 

性能展示

 

T7 Endonuclease I (Cat#14548)

//

 

切割活性強

 

使用翌圣和來自進口Supplier A*的T7 Endonuclease I分別與含有錯配堿基的dsDNA底物進行孵育,并通過瓊脂糖凝膠電泳分析譜帶變化。實驗結(jié)果表明,翌圣20 U的T7 Endonuclease I能有效切割200 ng含有錯配堿基的dsDNA,且切割效果媲美來自進口Supplier A*的T7 Endonuclease I。

 

圖2.T7 Endonuclease I切割效果驗證(注:底物投入量-200ng)

 

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活動細則:

1、活動時間:2025年4月8日-2025年4月30日;

2、活動名額有限,每位客戶限一套。

 

 

 

基因編輯相關(guān)產(chǎn)品展示

 

產(chǎn)品應(yīng)用

產(chǎn)品定位

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品貨號

通用型

NLS的SpCas9

Cas9 Nuclease

14701ES

熒光觀察/流式分選

EGFP熒光標簽的SpCas9

NLS-Cas9-EGFP Nuclease

11364ES

基因調(diào)控

無剪切酶活性的Cas9

dCas9 Nuclease

11351ES

小分子量遞送

Cas12a

ArCas12a Nuclease

14702ES

Cas12b

AapCas12b Nuclease

14808ES

sgRNA制備

sgRNA合成

Hifair® Precision sgRNA Synthesis Kit

11355ES

sgRNA純化

Hieff NGS® RNA Cleaner

12602ES

編輯效率檢測

編輯效率檢測

T7 Endonuclease I

14548ES

 

參考文獻

[1] Déclais A C, Hadden J, Phillips S E V, et al. The active site of the junction-resolving enzyme T7 endonuclease I[J]. Journal of molecular biology, 2001, 307(4): 1145-1158.

[2] Babon J J , Mckenzie M , Cotton R G H .The Use of Resolvases T4 Endonuclease VII and T7 Endonuclease I in Mutation Detection[J].Molecular Biotechnology, 2003, 23(1):73-81.DOI:10.1385/MB:23:1:73.

[3] Kazuki M , Shouta U , Junpei Y ,et al.Structure-specific DNA endonuclease T7 endonuclease I cleaves DNA containing UV-induced DNA lesions[J].The Journal of Biochemistry, 2024(1):1.DOI:10.1093/jb/mvae024.


 


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