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PUREfrex®2.0無(wú)細(xì)胞蛋白合成試劑盒使用方法及組分介紹
PUREfrex®2.0于2015年推出，相比1.0的版本PUREfrex®2.0的蛋白產(chǎn)量有所提升。PUREfrex®2.0改進(jìn)了從大腸桿菌中純化的所有組分的制備方法，并優(yōu)化了因子的組成，實(shí)現(xiàn)了比PUREfrex 1.0高2-10倍的蛋白質(zhì)生產(chǎn)率。
圖2.PUREfrex® 1.0和PUREfrex® 2.0對(duì)比數(shù)據(jù)
PUREfrex®2.0使用方法（僅供參考，操作方法請(qǐng)查閱產(chǎn)品說(shuō)明書）：
以20ul反應(yīng)體系為例，如果需要擴(kuò)大體積可以等比例增加對(duì)應(yīng)試劑。
1. 在室溫或37℃下保溫1分鐘使溶液I完-全融解，然后在冰上冷卻。
2. 在冰上融化溶液II和溶液III。
3. 將溶液I，溶液II和溶液III 渦旋后簡(jiǎn)短離心收集管底內(nèi)容物。
4. 根據(jù)下列表格配置反應(yīng)液，每1kb加入模板DNA 1-3ng/ul。
Water | 7-X μL |
Solution I | 10μL |
Solution II | 1μL |
Solution III | 1μL |
Template DNA | X μL |
總體積 | 20ul |
5. 在37°C的heat block或水浴中反應(yīng) 2~4 h，合成蛋白。
6. 分析合成蛋白。通過(guò)SDS-PAGE驗(yàn)證時(shí)，請(qǐng)用水稀釋反應(yīng)液后進(jìn)行電泳。
試劑盒組分（各組分中具體成分信息保密）：
組分名稱 | 組分內(nèi)容 | 保存溫度 |
Solution I | Amino acids, NTPs, tRNAs and substrates for enzymes etc. | -20℃ |
Solution II | Proteins in 30 % glycerol buffer | -20℃/-80℃ |
Solution III | Ribosome (20 μM) | -80℃ |
DHFR DNA | PCR product containing a gene encoding dihydrofolate reductase (DHFR) from E.coli as a positive control. (20 ng/μL) | -20℃ |
請(qǐng)注意：1.在打開(kāi)試劑盒之前請(qǐng)將試劑盒儲(chǔ)存在-80°C的溫度下。2.溶液II和溶液III避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品信息
貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
GFK-PF201-0.25-EX |
PUREfrex®2.0 | 1 x 250 µl |
GFK-PF201-2ML-EX | 2ml | |
GFK-PF201-10ML-EX | 5 x 2 ml |
當(dāng)您的蛋白質(zhì)需要分子伴侶的幫助或形成二硫鍵以形成正確的構(gòu)象時(shí)，只需向PUREfrex®2.0中添加補(bǔ)充試劑即可。
分子伴侶-幫助蛋白正確折疊，合成可溶形式蛋白質(zhì)
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
GFK-PF003-0.5-EX | DnaK Mix | 500 µl Equivalents |
GFK-PF003-10ML-EX | DnaK Mix | 5 x 2 ml Equivalents |
GFK-PF004-0.5-EX | GroE Mix | 500 µl Equivalents |
GFK-PF004-10ML-EX | GroE Mix | 5 x 2 ml Equivalents |
幫助形成二硫鍵的添加物
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
GFK-PF005-0.5-EX | DsbC Set | 500 µl Equivalents |
GFK-PF005-10ML-EX | DsbC Set | 5 x 2 ml Equivalents |
GFK-PF006-0.5-EX | PDI Set | 500 µl Equivalents |
GFK-PF006-10ML-EX | PDI Set | 5 x 2 ml Equivalents |
更多產(chǎn)品詳情請(qǐng)聯(lián)系Cosmo Bio中國(guó)授權(quán)代理——欣博盛生物
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