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反相液相色譜法同時(shí)測(cè)定發(fā)酵乳中的蛋白糖和氨基酸
◆ 說明
蛋白糖（英文名aspartame,又名阿斯巴甜）是由氨基酸組成的二肽類甜味劑。它具有類似蔗糖的甜味,不致齲,不致肥,無任何副作用,是保健食品、飲料等的低卡甜味劑。單純測(cè)定蛋白糖或氨基酸的報(bào)道已有不少,而對(duì)蛋白糖的測(cè)定大多局限于對(duì)配制軟飲料中單種蛋白糖成分或?qū)κ称诽砑觿┤缟亍⒎栏瘎┑瘸煞值臋z測(cè)分析方面?？紤]到在發(fā)酵乳制品中,氨基酸的種類及含量是常被檢測(cè)用于評(píng)價(jià)其營(yíng)養(yǎng)性能的重要指標(biāo),而蛋白糖在降解過程中也會(huì)產(chǎn)生一些氨基酸,為此,我們探討了在測(cè)定氨基酸的同時(shí)測(cè)定蛋白糖含量的可能性。
◆ 分析條件
儀器：STI P5000梯度系統(tǒng)
色譜柱：Vertex AQ-C18，5μm，150mm×4.6mmI.D.
檢測(cè)器：STI UV5000紫外檢測(cè)器
流動(dòng)相：流動(dòng)相A:19.0 g NaAc·3H2O溶于1 L超凈水中,加0.5 mL三乙胺,用冰醋酸調(diào)pH至6.40,脫氣。洗脫液B:600 g/L乙腈。稀釋液:710 mg Na2HPO4加超凈水1 L,用100 g/L的V（磷酸）∶V（乙腈） =95∶5調(diào)pH值為7.4,過濾備用。
梯度程序：
時(shí)間（分鐘） 流速（min） 流動(dòng)相A（%V） 流動(dòng)相B（%V）
0.5 1.0 90 10
10.5 1.0 49 51
16.5 1.0 0 100
17.0 1.0 0 100
17.5 1.5 0 100
18.0 1.5 90 10
23.0 1.5 90 10
23.5 1.0 90 10
柱溫：28℃
檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm
流速：1.0 mL/min
◆ 譜圖
PTC-氨基酸、PTC-蛋白糖、衍生試劑產(chǎn)物的色譜圖
Chromatogram of amino acids,aspartame and derivatives
1.Asp, 2.Glu, 3.Ser, 4.Gly, 5.His, 6.Arg, 7.Thr,8.Ala, 9.Amonia, 10.Pro, 11.Tyr, 12.Val, 13.Met,14.Cys, 15.Ile, 16.Leu, 17.Phe, 18.Lys, 19.aspartame.
◆ 結(jié)論
用上海禾工VERTEX STI 5000梯度液相色譜儀同時(shí)測(cè)定發(fā)酵乳中的蛋白糖和氨基酸，方便，準(zhǔn)確，快速。
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