基于已知對泛素具有親和力的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域,串聯(lián)泛素結(jié)合實體(TUBEs)已被開發(fā)用于分離和鑒定泛素化蛋白。 與單個泛素結(jié)合相關(guān)結(jié)構(gòu)域(UBA)相比,TUBEs對多泛素結(jié)構(gòu)的親和力可增加多達1000倍。此外,TUBEs對多泛素化蛋白具有保護作用,即使在相對較低的豐度下也能檢測到。這些特性有效地“捕獲”了處于多泛素化狀態(tài)的蛋白質(zhì)。TUBEs可用于從細胞和組織提取物中分離、富集和鑒定泛素化蛋白。與TUBE 1偶聯(lián)的磁性珠子可以在一步中高效回收多泛素化蛋白,無需離心。這種磁性TUBEs能夠更c底地去除未結(jié)合的上清液,從而降低背景。多泛素化蛋白可以輕松地從TUBEs中分離出來,用于蛋白質(zhì)組學研究或通過Western blotting進行鑒定。
UM501M是通過涂覆聚合物高容量磁性珠子設(shè)計的,以實現(xiàn)對多泛素化蛋白的z越富集,同時最小化在組織和細胞裂解液中與蛋白質(zhì)的非特異性結(jié)合。
艾美捷UM501M:高容量磁珠管1:
貨號:UM-0501M-1000
物理狀態(tài):液體
數(shù)量:1 mL磁性珠子
濃度:可變
儲存:+4℃,避免在此溫度以下儲存
UM501M:高容量磁珠管1應(yīng)用:
從細胞系、組織和器官中捕獲多泛素化蛋白
分離多泛素化蛋白用于蛋白質(zhì)組學研究
保護多泛素化蛋白免受去泛素化和蛋白酶體降解
UM501M:高容量磁珠管1優(yōu)勢:
一步回收多泛素化蛋白
無需離心,背景更低
從TUBEs中高效分離多泛素化蛋白
親和力比單個UBA結(jié)構(gòu)域高出多達1000倍
避免為捕獲而過度表達親和標簽泛素
文獻參考:
Hjerpe, R, Aillet, F, Lopitz-Otsoa, F, Lang, V, England, P, and Rodriguez, MS., Efficient protection and isolation of ubiquitylated proteins using tandem ubiquitin-binding entities. EMBO Rep. 10,1250-1258 (2009).
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Sarbanes, Stephanie L., Vincent A. Blomen, Eric Lam, S?ren Heissel, Joseph M. Luna, Thijn R. Brummelkamp,Erik Falck-Pedersen, H-Heinrich Hoffmann, and Charles M. Rice. (2021) "E3 ubiquitin ligase Mindbomb 1 facilitates nuclear delivery of adenovirus genomes." Proceedings of the National Academy of Sciences 118, no. 1: e2015794118.
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