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采用液相色譜測(cè)定六味地黃丸的含量

來(lái)源:上海禾工科學(xué)儀器有限公司   2009年09月28日 10:30  

六味地黃丸處方為:熟地黃160g,山茱萸(制)80g,牡丹皮60g,山藥80g,茯苓60g,澤瀉60g。2005版《中國(guó)藥典》采用液相色譜法測(cè)定了山茱萸中馬錢苷和牡丹皮中丹皮酚的含量。有關(guān)六味地黃丸制劑的含量測(cè)定方法總結(jié)如下。
    一、2005《中國(guó)藥典》六味地黃丸含量測(cè)定項(xiàng)下:
    山茱萸:
    色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以四氫呋喃-乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液(1:8:4:87)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為236nm,柱溫40℃。理論板數(shù)按馬錢苷峰計(jì)應(yīng)不低于4000。
    供試品溶液的制備:取本品水蜜丸或小蜜丸,切碎,取約0.7g,精密稱定;或取重量差異檢查項(xiàng)下的大蜜丸,剪碎,取約0.1g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入50%甲醇25ml,密塞,稱定重量,超聲提?。üβ?50W ,頻率33kH Z)15分鐘,放冷,再稱定重量,用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液10ml,置中性氧化鋁柱(100~200目,4g,內(nèi)徑1cm,干法裝柱)上,用40%甲醇適量使溶解,并轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中,加50%甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。
    牡丹皮
    色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水(70:30)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為274nm。理論板數(shù)按丹皮酚峰計(jì)應(yīng)不低于3500。
    供試品溶液的制備:取本品水蜜丸或小蜜丸,切碎,取約0.3g,精密稱定;或取重量差異檢查項(xiàng)下的大蜜丸,剪碎,取約0.4g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入50%甲醇50ml,密塞,稱定重量,超聲提?。üβ?50W ,頻率33kH Z)45分鐘,放冷,再稱定重量,用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。

    二、以單皮酚為指標(biāo)
    李瑋玲等采用SPE-液相色譜法法測(cè)定六味地黃丸中丹皮酚的含量。液相色譜儀為Waters 2695;色譜柱為Hypersil ODS2柱(205mm×4.6mm, 5μm);流動(dòng)相為甲醇-2%冰醋酸(55:45);流速為1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為275nm;柱溫25℃。樣品用甲醇超聲提取后經(jīng)Sep-Pak C18微柱處理,收集第12~14mL流出液。
    仲英等采用薄層掃描測(cè)定了六味地黃丸中丹皮酚的含量,采用日本島津CS- 910 雙波長(zhǎng)薄層掃描儀。層析條件:硅膠G板;展開溶劑:環(huán)乙烷-氯仿-無(wú)水乙醇7:3:1。薄層掃描條件:反射法鋸齒掃描,波長(zhǎng)λs=274nm,λR= 365nm;掃描速度20mm/min;狹縫1.25×1.25mm;Sx=3。樣品用無(wú)水乙醇回流提取。
    汪顯陽(yáng)等用差示光譜法測(cè)定六味地黃丸中丹皮酚的含量,采用島津UV 2240 分光光度計(jì), 751G 分光光度計(jì)。樣品用乙醇浸出提取, 缺丹皮酚樣品為空白樣品。以蒸餾水和0.01mol/L氫氧化鈉溶液分別定容,選擇352nm為測(cè)定波長(zhǎng),370nm為參比波長(zhǎng)。
    趙新峰等用膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜法分離測(cè)定中藥材牡丹皮及中成藥六味地黃丸中丹皮酚的含量。定量采用內(nèi)標(biāo)法,選取蘆丁為內(nèi)標(biāo)。Unimicro 毛細(xì)管電泳儀美國(guó)Hyperquan.Inc 公司。所用毛細(xì)管規(guī)格為55cm有效長(zhǎng)度50cm×75μm,檢測(cè)波長(zhǎng)274nm,電壓15 kV ,背景電解質(zhì)分別為30mmol/L SDS-30 mmol/ L硼砂,20mmol/ LSDS-50mmol/ L硼砂pH9.4。供試品溶液的配制:牡丹皮藥材加95%乙醇超聲提??;六味地黃丸粉碎后,與5g硅藻土色譜載體,40~60目混研,研勻,烘干,無(wú)水乙醇超聲提取。
    宋麗麗等用近紅外光譜法測(cè)定六味地黃丸中丹皮酚,分別采用偏zui小二乘PLS、主成分分析-BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、小波變換-BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)對(duì)所采集的樣本數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。
    完茂林等測(cè)定六味地黃丸中丹皮酚的含量,采用毛細(xì)管氣相色譜法,以正十六烷為內(nèi)標(biāo)。日本島津GC-9A氣相色譜儀;色譜柱為熔融彈性毛細(xì)管柱28m×0. 28mm ,5μm,涂布SE-30 0.26μm, N2 流速60ml/min, H2流速50ml/min,空氣流速500ml/min,柱溫180℃,汽化器、檢測(cè)器320℃。樣品制備:六味地黃丸研細(xì)用乙醇超聲處理后用中性氧化鋁柱100~200 目,10 g,φ11mm處理,收集乙醇洗脫液,濃縮并定容。

    三、以齊墩果酸或熊果酸為指標(biāo)
    馮燕芹等測(cè)定六味地黃丸(濃縮丸)中熊果酸的含量,采用HPLC法。色譜柱為ALLTIMA C18 5μ;流動(dòng)相為甲醇-水(80:20);流速為0.5mL/min;ELSD檢測(cè)器漂移管溫度:80℃。樣品用乙醚回流提取。
    丁晴等測(cè)定六味地黃丸及六味地黃膠囊中齊墩果酸、熊果酸的含量,采用HPLC法。液相色譜儀為島津LC-10AD;色譜柱為Shim-Pack C18分析柱4.6mm×150mm,5μm;流動(dòng)相為乙腈-甲醇-水-乙酸胺 70:16:14:0.5;流速1mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)215nm;柱溫為室溫。樣品處理方法:六味地黃丸(濃縮丸)用水溶解并過(guò)濾后,用乙<

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