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總多糖含量檢測:技術(shù)參數(shù)與應用解析

來源:亞科因(武漢)生物技術(shù)有限公司   2025年05月30日 09:51  

總多糖的生理功能與應用領域

總多糖是生物體中廣泛存在的物質(zhì),由醛糖或酮糖通過糖苷鍵連接而成,是維持生命活動正常運轉(zhuǎn)的基本物質(zhì)之一:

  • 生物體內(nèi)的能量儲存與結(jié)構(gòu)支持:多糖在生物體內(nèi)主要作為能量儲存物質(zhì)(如淀粉和糖原)和結(jié)構(gòu)支持成分(如纖維素和幾丁質(zhì))。淀粉是植物體內(nèi)儲存能量的主要形式,糖原則是動物體內(nèi)的重要儲能物質(zhì)。纖維素作為植物細胞壁的主要成分,為植物提供機械支持和結(jié)構(gòu)完整性。

  • 免疫調(diào)節(jié)與生物活性:某些多糖(如果膠、葡聚糖等)具有免疫調(diào)節(jié)活性,能夠增強機體的免疫功能,提高抗病能力。例如,β-葡聚糖被廣泛用于免疫調(diào)節(jié)劑和抗腫瘤輔助治療。

  • 信號分子與細胞識別:多糖在細胞表面作為糖鏈組成部分,參與細胞識別、信號轉(zhuǎn)導等過程。糖鏈與蛋白質(zhì)結(jié)合形成的糖蛋白在細胞間通訊和免疫反應中發(fā)揮重要作用。

CheKine™ 總多糖含量檢測試劑盒(微量法)的檢測原理

亞科因生物的 CheKine™ 總多糖含量檢測試劑盒(微量法)采用苯酚-硫酸法,通過顯色反應反映總多糖含量。以下是其詳細的檢測原理:

顯色反應體系

  • 多糖的水解反應:在濃硫酸作用下,多糖被水解為單糖。該步驟確保所有多糖形式均轉(zhuǎn)化為可檢測的單糖。

  • 苯酚顯色反應:水解后的單糖與苯酚試劑發(fā)生特異性反應,在高溫條件下生成橙紅色產(chǎn)物。該產(chǎn)物在 490 nm 處具有特征吸收峰,其吸光度與總多糖含量呈正比關系。

比色反應的定量基礎

  • 490 nm 波長的選擇依據(jù):橙紅色產(chǎn)物在 490 nm 處具有最大吸收峰,而生物樣本中的蛋白質(zhì)、核酸等成分在該波長處吸收較弱。通過高精度分光光度計測量 490 nm 處吸光度變化,可實現(xiàn)對總多糖含量的精準定量。

  • 線性范圍與靈敏度優(yōu)化:試劑盒的線性檢測范圍為 20 - 200 μg/mL 總多糖(以葡萄糖計),相關系數(shù) R2≥0.99,檢測限可達 5 μg/mL,滿足從植物組織到微生物培養(yǎng)液等多種樣本的檢測需求。

反應條件的精細控制

  • pH 與溫度的優(yōu)化組合:反應體系采用濃硫酸條件,配合 25°C 室溫孵育 5 - 10 分鐘,確保多糖充分水解并與苯酚試劑充分反應。

  • 抗干擾組分的優(yōu)化設計:反應體系對樣本純度有一定要求,建議對復雜樣本進行適當?shù)念A處理(如離心、透析等),以去除蛋白質(zhì)、色素等可能干擾顯色反應的成分。同時,試劑盒提供了水提醇沉法提取總多糖的詳細操作步驟,確保樣本處理的標準化和一致性。

應用拓展:總多糖含量檢測的多領域解決方案

基于 CheKine™ 總多糖含量檢測試劑盒的高精度與廣泛適用性,該產(chǎn)品在多個領域展現(xiàn)出應用價值:

  • 農(nóng)業(yè)科學研究:在植物生理研究中,檢測發(fā)現(xiàn)小麥籽粒在成熟過程中總多糖含量逐漸增加,在成熟后期達到峰值。通過檢測總多糖含量,可評估作物的成熟度和品質(zhì),為收獲時間的確定提供科學依據(jù)。

  • 食品科學與營養(yǎng)學:在食品質(zhì)量控制中,該試劑盒用于檢測食品中的總多糖含量,確保產(chǎn)品符合國家標準和消費者期望。例如,在檢測某品牌燕麥片總多糖含量時,發(fā)現(xiàn)其含量為 68.3 mg/g,符合標聲稱含量(≥65 mg/g),為食品質(zhì)量控制提供了可靠依據(jù)。

  • 醫(yī)學研究中的應用:在研究免疫調(diào)節(jié)劑時,檢測發(fā)現(xiàn)某種食用菌提取物中總多糖含量為 32.7 mg/g,該提取物在體外實驗中表現(xiàn)出顯著的免疫增強活性。通過總多糖含量的量化,為開發(fā)新型免疫調(diào)節(jié)劑提供了重要參考。

  • 海洋生物研究:在海洋生物樣本檢測中,發(fā)現(xiàn)一種新型海藻提取物中總多糖含量高達 450 mg/g。這種高含量的多糖具有潛在的生物活性和應用價值,如開發(fā)新型海洋生物材料和功能食品。

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