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透析的原理和過(guò)程

來(lái)源:上海聯(lián)碩生物科技有限公司   2025年06月05日 10:55  

一、透析的原理

透析只需要使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中大分子量的生物分子被截留在袋內(nèi),而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外,直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”,袋(膜)外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。

透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓,擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。

二、透析的過(guò)程

1)把適量的透析液(緩沖液)加入透析裝置。透析液的體積應(yīng)為樣品體積量的100倍。(例如,在1L透析液中透析10ml的樣品)

2)裁剪適當(dāng)長(zhǎng)度的透析管。預(yù)留一段額外長(zhǎng)度(約占總樣品體積量的20%)作為頭部空間。

3)把透析管插入打開的透析夾,在約超出透析夾3-5mm的位置再夾住。不要折疊透析袋。

4)由透析管開口端將樣品裝入。調(diào)整一下頂部空間的長(zhǎng)度,夾緊透析夾。

5)把透析樣品放在合適的透析緩沖液中。

6)透析要根據(jù)具體的應(yīng)用需求。通常情況下,允許過(guò)夜透析。在持續(xù)透析的過(guò)程中,至少要進(jìn)行3次全部更換透析液。建議在(透析后)2-4小時(shí),6-8小時(shí)和10-14小時(shí)(第二天早晨)更換透析液。在最后一次透析液的更換后,要至少繼續(xù)進(jìn)行2小時(shí)的透析。

注意:對(duì)于高濃度污染物,樣品可能需要較長(zhǎng)的時(shí)間透析,透析液需要更頻繁的更換。

7)透析溫度主要取決于樣品。溫度最高限制主要取決于膜的類型。纖維素透析袋可以承受的溫度高達(dá)37℃。再生纖維素透析袋可以承受的溫度高達(dá)60℃。

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