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內(nèi)氏放線菌的培養(yǎng)條件與傳代方法及注意事項!

來源:北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司   2025年06月13日 15:50  

內(nèi)氏放線菌形態(tài)微白堅實的菌落:微菌落顆粒狀,密致,帶放射狀有分枝的菌絲,偶見整齊顆粒狀半球形菌落;大菌落直徑達2毫米,光滑白色,凸面至臍狀菌落見,表面不規(guī)則的凹陷菌落較少。細胞為陽性或陰性桿菌,直徑和長度不一。

 

一、菌種簡介

平臺編號:Bio-134610

規(guī)格:凍干物

拉丁屬名:Actinomyces Naeslundii

菌株名稱:內(nèi)氏放線菌

培養(yǎng)基特殊蛋白胨:23.0,可溶性淀粉:1.0,氯化鈉:5.0,瓊脂:10.0,pH:7.3±0.2(25℃)

生長條件:37℃;24-48h;5%CO2

存儲條件:2-8℃

安全等級:2

形態(tài)菌落:直徑為1-2mm,圓形,邊緣整齊,不透明,正面白色,反面白色,中間凸起,表面光滑,表面明亮,質(zhì)地濕潤,質(zhì)地黏稠,G+(藍紫色),純度:純,桿菌

模式菌株:no

來源編號:ATCC 19039

用途:研究

注意事項:僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))

 

二、培養(yǎng)基

哥倫比亞血平板(建議購買市面上成品培養(yǎng)基)

 

三、傳代方法

①準(zhǔn)備1支含有5~10mL液體培養(yǎng)基的試管和2個平板;②安全柜中打開,用酒精燈灼燒頂部,后迅速滴上無菌水使之破裂,隨后用鑷子將其敲碎;③吸取0.5mL液體培養(yǎng)基打入凍干管,充分溶解后重新打回液體試管中,混勻;④吸取0.2mL菌懸液打入平板中,涂布均勻,重復(fù)兩次獲得兩個平板;⑤將液體試管和平板全部置于上述培養(yǎng)條件下培養(yǎng),菌種長出即可使用。

 

四、保藏條件

斜面菌種和凍干菌種應(yīng)在 2-8°C 保存。西林瓶請放-20°C 保存。甘油請置于-80°C。

 

五、注意事項

1)準(zhǔn)備 1 支含有 5-10ml 的液體培養(yǎng)基的試管和 2 個平板;生物安全柜打開,用酒精燈灼燒頂部,后迅速滴上無菌水使之破裂,隨后用鑷子使其敲碎;吸取 0.5ml 液體培養(yǎng)基打入凍干管,充分溶解后重新打回液體試管中,混勻;吸取 0.2ml 菌懸液打入平板中,涂布均勻重復(fù)獲得兩個平板;將液體試管和平板全部置于要求的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)。

2)經(jīng)過冷凍干燥保藏,菌種處于休眠狀態(tài),復(fù)蘇培養(yǎng)時可能會延遲生長,這時需較長的培養(yǎng)時間; 若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物(非凍干菌),則可以直接用于您的實驗,或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)如有不明白之處,請務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員,避免不必要的損失;

3)微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方,室溫放置時間過長會導(dǎo)致菌種衰退;

4)菌種操作應(yīng)在無菌條件下進行;轉(zhuǎn)種完畢,應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理;

5)應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時轉(zhuǎn)接,凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年;

6)菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降,應(yīng)及時和微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系。

7)如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況,請在收到菌種后 2 個月內(nèi)聯(lián)系,逾期不予受理;

8)打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護設(shè)備中進行,生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作,打管時凍干管應(yīng)遠離面部,保護眼睛。

9)安瓿瓶開封:用浸過 75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量(2-3滴)無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍,并保持在火焰旁操作。

10)甘油管使用:使用本甘油菌時可以不用融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或進行液體培養(yǎng)即可。也可以融解后使用,但隨著凍融次數(shù)的增加,細菌的活力會逐漸下降。

 

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