3000型氨基酸分析儀采用陽離子交換色譜與柱后茚三酮衍生技術(shù),通過多維度分離與高靈敏度檢測,實現(xiàn)對食品、生物樣本中氨基酸的精準(zhǔn)定量分析。其核心原理涵蓋離子交換分離、柱后衍生反應(yīng)及光度檢測三大模塊,以下從技術(shù)原理、操作流程及創(chuàng)新優(yōu)勢展開解析。
一、離子交換色譜:基于電荷差異的分離機制
該儀器搭載陽離子交換樹脂色譜柱,通過流動相(緩沖液)推動氨基酸混合物流經(jīng)柱體。不同氨基酸因側(cè)鏈基團差異(如酸性、堿性、中性)與樹脂中的磺酸基團發(fā)生離子交換,結(jié)合強度與pH值密切相關(guān)。例如,在pH2.2的酸性條件下,帶正電荷的氨基酸(如賴氨酸、精氨酸)與樹脂結(jié)合力較強,而中性氨基酸(如丙氨酸、纈氨酸)結(jié)合力較弱。通過梯度洗脫(如從pH2.2逐步升至pH4.0),不同氨基酸按保留時間依次洗脫,實現(xiàn)高效分離。該技術(shù)可同時分析21種蛋白水解氨基酸及43種生理體液游離氨基酸,分離度達1.2以上,滿足國標(biāo)GB 5009.124要求。
二、柱后茚三酮衍生:高靈敏度顯色反應(yīng)
分離后的氨基酸與茚三酮試劑在高溫反應(yīng)器(115-120℃)中發(fā)生顯色反應(yīng),生成紫色或黃色化合物。其中,除脯氨酸、羥脯氨酸生成黃色產(chǎn)物(440nm檢測)外,其余氨基酸均生成紫色產(chǎn)物(570nm檢測)。該反應(yīng)靈敏度達納摩爾級別,可檢測低至0.1 μmol/L的氨基酸濃度。3000型儀器通過雙波長檢測器同步采集信號,結(jié)合惰性氣體保護的試劑瓶與獨立閥門設(shè)計,確保衍生反應(yīng)的穩(wěn)定性與試劑壽命。
三、創(chuàng)新優(yōu)勢與性能突破
1.全自動化操作:儀器配備200位全封閉樣品瓶托盤與自動進樣器,支持0.1-100 μL進樣量,配合洗針功能避免交叉污染。柱溫箱與衍生系統(tǒng)獨立控溫(±0.1°C),確保重現(xiàn)性。
2.高效梯度洗脫:采用四元低壓梯度泵,流速范圍0.001-9.999 mL/min,梯度混合精密度≤±0.2%。鈉鹽體系分析時間縮短至30-50分鐘,鋰鹽體系分析生理體液樣本僅需90-180分鐘。
3.智能化軟件支持:中文界面軟件集成梯度程序設(shè)定、色譜分峰與定量功能,支持審計追蹤與數(shù)據(jù)管理。內(nèi)置國標(biāo)方法庫,一鍵調(diào)用食品、飼料等檢測模板,簡化操作流程。
3000型氨基酸分析儀通過離子交換色譜與柱后衍生技術(shù)的深度融合,實現(xiàn)了高分離度、高靈敏度與高自動化水平的統(tǒng)一。其技術(shù)參數(shù)與操作流程嚴(yán)格遵循國際標(biāo)準(zhǔn),廣泛應(yīng)用于食品安全、臨床診斷及科研領(lǐng)域,為氨基酸分析提供了可靠的技術(shù)保障。
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