產酸克雷伯菌是克雷伯菌屬中的一個重要物種,形態(tài)呈直桿狀,通常較粗短,大多數(shù)菌株具有多糖莢膜,無鞭毛,無芽孢。
根據中國國標GB14922-2022《實驗動物微生物、寄生蟲學等級及監(jiān)測》產酸克雷伯菌未被列為SPF級動物必須排除的病原體。
但杰克遜(JAX)實驗室作為優(yōu)秀的遺傳資源庫和實驗動物供應商,對實驗動物的微生物質量控制極為嚴格。產酸克雷伯菌被JAX實驗室明確列為“排除性病原體”,即其供應的所有品系實驗動物(尤其是免疫缺陷品系)均要求無此菌定植。免疫缺陷小鼠是該菌的高風險群體,研究發(fā)現(xiàn),免疫缺陷小鼠中產酸克雷伯菌的檢出率達4.55%。
其造成的風險如下:
機會性致病性:可導致免疫缺陷小鼠(如NSG、NOG品系)的致命性感染(敗血癥、肺炎)。
干擾實驗結果:在腸道、呼吸道或系統(tǒng)性感染模型中可能改變免疫反應或病理結局。
耐藥性風險:其多重耐藥性可能影響抗生素治療實驗的可靠性。
陽性結果處理
立即隔離:陽性動物及同籠動物移至獨立隔離設施。
群體處置:
免疫健全鼠:嘗試抗生素治療(根據藥敏,如阿米卡星+頭孢他啶)。
免疫缺陷鼠:直接淘汰(因治療無效且高致死風險)。
設施凈化:
過氧化氫蒸氣或含氯消毒劑處理環(huán)境;
連續(xù)3次環(huán)境檢測陰性(間隔1周)后方可重啟。
質量控制體系
標準菌株:ATCC13182定期驗證PCR及生化試驗準確性。
環(huán)境監(jiān)測:每月對IVC籠具出風口、飲水系統(tǒng)采樣,采用PCR篩查。
人員操作:無菌服+手套+口罩,單向物流避免交叉污染。
滅菌管理:
飼料/墊料:121℃高壓滅菌30分鐘或鈷-60輻照(≥25kGy);
飲水:酸化處理(pH2.5-3.0)抑制革蘭陰性菌生長。
JAX實驗室檢測方法
選擇性培養(yǎng)+生化確認
麥康凱瓊脂分離→挑取粘稠乳糖發(fā)酵(粉紅色)菌落→革蘭染色→關鍵生化試驗(吲哚+、鳥氨酸+)。輔助檢測:VP試驗(+)、檸檬酸鹽利用(+)、尿素酶(+)
PCR檢測
金標準方法:使用多種特異性引物,靈敏度高(可檢測低載量菌),特異性強。
測序驗證
對疑似菌株進行基因測序確認。
JAX實驗室相比普通商業(yè)供應商的培養(yǎng)法+生化鑒定更注重PCR實驗。翼和病原菌檢測試劑盒能夠很好的檢測產酸克雷伯菌在內的多種病原微生物,符合實驗室的要求,使用的Biowing®Common Bacteria Primer&Probe能夠匹配到目標病原微生物的DNA。
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