前言甜菜 (Beta vulgaris L.) 作為重要的糖料作物，在中國(guó)北方種植已有 100 多年的歷史[1]。另外，甜菜具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，其中含有的甜菜堿和甜菜纖維也具有一定的藥用價(jià)值[2, 3]。為提高產(chǎn)量，甜菜種植中廣泛使用肥料和農(nóng)藥等農(nóng)用化學(xué)品。然而，植株中的農(nóng)藥殘留會(huì)影響甜菜質(zhì)量和安全。許多國(guó)家/地區(qū)（包括中國(guó)、美國(guó)和日本等）和國(guó)際組織均規(guī)定了農(nóng)藥在食品中的最大殘留量 (MRL)。中國(guó)新修訂的《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留量》(GB 2763-2021) 將甜菜中的大部分農(nóng)藥殘留水平設(shè)定為10–500 µg/kg[4]。檢測(cè)甜菜中的農(nóng)藥殘留對(duì)于確保食品安全和遵循生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范都有著非常重要的意義。此前，已有研究報(bào)道了基于氣相色譜和氣相色譜質(zhì)譜檢測(cè)甜菜中的農(nóng)藥多殘留分析[5,6]。然而，這些報(bào)道中檢測(cè)的農(nóng)藥品種為幾種或者幾十種，并未對(duì) 200 種以上的農(nóng)藥進(jìn)行分析。本文介紹了一種用于分析甜菜中 267 種農(nóng)藥的簡(jiǎn)便高通量方法，這些目標(biāo)農(nóng)藥化合物包含《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中 208 種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》(GB 23200.113-2018)[7] 的 222 種農(nóng)藥和代謝物品種以及 45 種擴(kuò)項(xiàng)新增的農(nóng)藥及代謝物品種。該方法將 QuEChERS 樣品前處理方法與 Agilent 7000 系列三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)相結(jié)合，操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、快速、準(zhǔn)確，能夠滿足定量分析甜菜中 200 多種農(nóng)藥殘留的要求。

實(shí)驗(yàn)部分試劑和樣品HPLC 級(jí)乙腈和乙酸乙酯，購(gòu)自飛世爾科學(xué)公司（Fair Lawn，USA）；農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，由農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所（天津）提供，用丙酮配制 10 mg/L 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，–20 °C 儲(chǔ)存，備用。儀器和設(shè)備Agilent 7890A 氣相色譜與 Agilent 7000D 三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用，并配備 Agilent 7693 自動(dòng)進(jìn)樣器。色譜柱采用 Agilent VF-1701ms（30 m × 0.25 mm, 0.25 µm，貨號(hào) CP9151）。QuEChERS 萃取鹽包（內(nèi)含 4 g 無(wú)水 MgSO4；1 g NaCl；1 g 檸檬酸鈉二水合物；0.5 g 檸檬酸二鈉鹽倍半水合物，陶瓷均質(zhì)子）（貨號(hào) 5982-5650CH）和 QuEChERS 分散式固相萃取離心管（內(nèi)含 900 mg 無(wú)水硫酸鎂、150 mg PSA）（貨號(hào) 5982-5056），以及PSA 和無(wú)水 MgSO4 的散裝填料，均為安捷倫公司產(chǎn)品。

氣相色譜條件色譜柱： VF-1701 ms, 30 m × 0.25 mm, 0.25 µm柱溫箱升溫程序：在 40 °C 下保持 1 min，然后以 40 °C/min 的速率升溫至 120 °C，以 5 °C/min 的速率升溫至 240 °C，再以 12 °C/min 的速率升溫至300 °C，并保持 11 min載氣： 氦氣流速： 1.0 mL/min進(jìn)樣口溫度： 280 °C進(jìn)樣量： 1.0 µL進(jìn)樣模式： 不分流，1.5 min 后開(kāi)啟吹掃

質(zhì)譜條件離子源： EI離子化電壓： 70 eV離子源溫度： 280 °C四極桿溫度： Q1 150 °C，Q2 150 °C接口溫度： 280 °C溶劑延遲： 3.0 min222 種農(nóng)藥和代謝物的保留時(shí)間和 MRM 參數(shù)基于 GB 23200.113-2018 的規(guī)定[7]，增加的 45 種農(nóng)藥的保留時(shí)間和 MRM 參數(shù)列于表1 中。

加標(biāo)回收率測(cè)試通過(guò)加標(biāo)回收率測(cè)試來(lái)考察方法準(zhǔn)確度和精密度。實(shí)驗(yàn)采用 2、5、10、100 和 200 µg/kg 五個(gè)加標(biāo)濃度，并在每個(gè)加標(biāo)濃度下配制五個(gè)平行樣，各加標(biāo)樣品在萃取前于室溫下靜置 30 分鐘。

結(jié)果與討論P(yáng)SA 凈化材料對(duì)農(nóng)藥的吸附目前 QuEChERS 方法中常用的凈化材料包括 C18、GCB 和 PSA。其中 C18 材料在硅膠表面上鍵合有 C18 烷基基團(tuán)，適用于去除樣品基質(zhì)中的非極性成分（例如脂肪酸等），對(duì)農(nóng)藥無(wú)吸附作用；GCB 主要用于除去色素；PSA 為一級(jí)二級(jí)胺，可以凈化乙腈提取液中的糖類(lèi)、酸性物質(zhì)等極性干擾物，但其在凈化基質(zhì)的同時(shí)可能對(duì)一些化學(xué)性質(zhì)相似的農(nóng)藥具有吸附作用，造成回收率下降。因此，本研究考察了 267 種農(nóng)藥在不同 PSA 用量（0 mg、30 mg、60 mg、150 mg 和 300 mg）下的回收率，以確定 PSA對(duì)目標(biāo)農(nóng)藥化合物的吸附效應(yīng)。結(jié)果表明，在 267 種農(nóng)藥中，除異狄氏ji醛以外，其他農(nóng)藥化合物在 PSA 材料表面均未發(fā)生明顯的吸附，大部分農(nóng)藥的回收率在 80%–120% 之間。PSA 對(duì)異狄氏ji醛的吸附較為嚴(yán)重，即使 PSA 用量為 30 mg，所得回收率仍然只有 50% 左右，無(wú)法滿足檢測(cè)要求。因此，在異狄氏ji醛分析中，不使用 PSA 進(jìn)行凈化，直接用 900 mg 無(wú)水硫酸鎂進(jìn)行凈化。對(duì)于其他農(nóng)藥化合物，則采用 Agilent QuEChERS 分散式固相萃取離心管中 150 mg PSA 的用量和 900 mg 無(wú)水硫酸鎂進(jìn)行凈化。采用全掃描模式對(duì)不同用量的 PSA 對(duì)空白甜菜基質(zhì)的凈化效果進(jìn)行了比較，結(jié)果見(jiàn)圖 2。從圖中可以看出，隨著 PSA 用量的增加，基質(zhì)凈化效果逐漸提高，150 mg 和 300 mg 的凈化效果相差不大，所以最終選擇 150 mg 作為除異狄氏ji醛之外的其他農(nóng)藥的 PSA 用量。

線性和定量限由于基質(zhì)效應(yīng)的存在，本方法采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量。在基質(zhì)加標(biāo)濃度 2–200 µg/kg 的范圍內(nèi)采用內(nèi)標(biāo)法繪制甜菜基質(zhì)中目標(biāo)農(nóng)藥化合物的七點(diǎn)校準(zhǔn)曲線。結(jié)果顯示，所有農(nóng)藥化合物的線性回歸曲線的決定系數(shù) (R2) 均不低于 0.99，且大部分化合物的 R2 在 0.995 以上，表明該方法在 2–200 µg/kg 的濃度范圍內(nèi)具有良好的線性。農(nóng)藥化合物的定量限基于加標(biāo)回收率（加標(biāo)濃度分別為 2、5、10、100 和 200 µg/kg）和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果，定義為目標(biāo)化合物滿足回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差要求的低驗(yàn)證加標(biāo)濃度，具體信息參照 SANTE 11312/2021[8]。結(jié)果顯示，267 種農(nóng)藥的定量限均介于 2–10 µg/kg 之間，其中 261 種農(nóng)藥的定量限為 2 µg/kg。圖 3 展示了甜菜基質(zhì)中加標(biāo)濃度為 2 µg/kg 的部分新增農(nóng)藥的MRM 色譜圖，在 2 µg/kg 的低加標(biāo)濃度下，可以看到化合物的定性定量離子都有很好的峰形，表明方法有很高的靈敏度。

回收率和精密度對(duì)甜菜基質(zhì)中的 267 種農(nóng)藥進(jìn)行加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)，并分別對(duì)加標(biāo)濃度 2、5、10、100 和 200 µg/kg 下處于不同回收率和精密度（相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差）范圍內(nèi)的農(nóng)藥數(shù)量分布進(jìn)行作圖，如圖 4 所示。從圖中可以看出，267 種農(nóng)藥中的大多數(shù)農(nóng)藥的回收率介于80%–120% 之間，且相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于 10%，表明該方法回收率和精密度良好，滿足 SANTE 11312/2021 的回收率的要求[8]。

結(jié)論本研究建立了同時(shí)檢測(cè)甜菜中 267 種農(nóng)藥及代謝物的 QuEChERS前處理結(jié)合氣相色譜三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀的分析方法。該方法具有良好的線性，添加回收率和精密度良好，絕大多數(shù)農(nóng)藥的定量限為 2 µg/kg，靈敏度高，方法性能滿足農(nóng)藥殘留在農(nóng)作物中的檢測(cè)分析要求，具有很好的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。