Jurkat細(xì)胞是一種在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中具有重要地位的永生化人T淋巴細(xì)胞系,是從一位急性T細(xì)胞白血病患者的外周血中分離出來的。它屬于T淋巴細(xì)胞,具有典型的T細(xì)胞標(biāo)志物,如CD3、CD4和CD8等,這些標(biāo)志物使其在T細(xì)胞相關(guān)的研究中具有代表性。這是一種懸浮生長的細(xì)胞系,具有無限增殖的能力,可在實驗室條件下長期培養(yǎng),一般1:3傳代,2 -3天傳一代,常用的培養(yǎng)基為RPMI -1640 +10FBS。
Jurkat細(xì)胞的使用注意事項:
1.細(xì)胞培養(yǎng)方面
-培養(yǎng)條件:是種懸浮細(xì)胞,需在37℃、CO2的條件下培養(yǎng),且對血清要求較高,建議使用進(jìn)口優(yōu)質(zhì)血清。
-細(xì)胞聚團(tuán):呈聚團(tuán)懸浮生長,細(xì)胞團(tuán)較大時可用移液槍輕吹1-2下,將細(xì)胞團(tuán)吹打成小團(tuán),防止團(tuán)塊中間的細(xì)胞因營養(yǎng)不足而死亡,但除非實驗需要,不建議經(jīng)常將細(xì)胞吹散成單個細(xì)胞。
-離心操作:Jurkat細(xì)胞對離心敏感,常規(guī)擴(kuò)增培養(yǎng)時不建議頻繁離心,換液可使用半換液法,傳代可混勻后直接分瓶并補足培養(yǎng)基。若細(xì)胞碎片較多且細(xì)胞密度較高時可以離心換液以去除部分碎片。
2.實驗操作方面
-無菌操作:在細(xì)胞培養(yǎng)和實驗操作過程中,必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作原則,防止細(xì)菌、真菌、支原體等污染。所有操作應(yīng)在超凈工作臺中進(jìn)行,使用的器械、培養(yǎng)基、耗材等均需無菌處理。
-實驗分組與對照:在進(jìn)行實驗時,應(yīng)設(shè)置合理的實驗分組和對照,如空白對照組、陰性對照組、陽性對照組等,以準(zhǔn)確評估實驗因素對Jurkat細(xì)胞的影響。
-藥物處理:如果實驗涉及藥物處理,應(yīng)注意藥物的溶解性、穩(wěn)定性和作用濃度。藥物應(yīng)按照說明書的要求進(jìn)行配制和儲存,并在有效期內(nèi)使用。在加入藥物時,應(yīng)確保藥物與細(xì)胞充分接觸,但也要避免藥物濃度過高對細(xì)胞造成過度損傷。

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