概述

2025年版《中國藥典》將于10月1日起正式實施，在生物制品質(zhì)量控制及病毒安全性評價方面做出了關(guān)鍵修訂，對推動生物醫(yī)藥行業(yè)發(fā)展十分重要。

在《2025年版中國藥典《生物制品生產(chǎn)用動物細胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制》變化及解讀（一）》文章中，我們對細胞檢定總體變化、項目及方法的變化進行了解讀。

接下來我們將聚焦2025年版藥典中“細胞內(nèi)外源病毒因子檢查”部分的變化，解讀病毒因子檢查總述、體外培養(yǎng)法、動物體內(nèi)接種法以及牛源、豬源和其他特定病毒檢測方面的更改或新增內(nèi)容。

注：以下內(nèi)容中，“XXXX”表示刪除內(nèi)容，綠色字體表示更改內(nèi)容，紅色字體為新增內(nèi)容。

01細胞內(nèi)外源病毒因子總述變化與解讀

生物制品以細胞、動物或人源組織和體液為起始原材料，存在病毒污染的風險，因此國內(nèi)外監(jiān)管機構(gòu)都對生物制品的病毒安全性控制進行了要求和規(guī)定。病毒因子污染可能來自原細胞系（細胞基質(zhì)）本身，也可能是生產(chǎn)過程中帶入的外源病毒，都有可能在臨床上產(chǎn)生嚴重的副作用。

在2025年版藥典變化與解讀（一）中，我們對細胞庫檢定的基本要求進行了分享，接下來我們一起看看“細胞內(nèi)、外源病毒因子檢查”有哪些變化吧！

02體外培養(yǎng)法檢測變化與解讀

該檢項為保持與國際接軌，進行了多處修改：

1. 刪除指示細胞“同組織類型”的要求

2. 增加昆蟲細胞樣本檢測用指示細胞的特殊要求

3. 刪除接種量與細胞傳代培養(yǎng)的細節(jié)描述

4. 指示細胞培養(yǎng)天數(shù)由14天修訂為28天

5. 規(guī)定了新鮮紅細胞的暫存條件和配置要求

6. 進行血吸附試驗和血凝集試驗時既可以使用混合的豚鼠紅細胞和雞紅細胞進行也可使用單一紅細胞分別檢測

7. 對于只有使用懸浮或半懸浮指示細胞檢測時，可以僅進行紅細胞凝集試驗，而不再硬性要求做血吸附試驗

8. 因所有指示細胞均培養(yǎng)28天，故刪除人二倍體細胞培養(yǎng)28天的經(jīng)驗描述

03逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測變化與解讀

逆轉(zhuǎn)錄病毒（Retrovirus）屬于具有單鏈RNA基因組的包膜病毒，通過逆轉(zhuǎn)錄酶將RNA基因組轉(zhuǎn)化為雙鏈DNA，并整合至宿主細胞染色體中。逆轉(zhuǎn)錄病毒具有高效整合能力和廣泛的宿主細胞適應(yīng)性，在基因治療、細胞工程及基礎(chǔ)研究領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。

同時，小鼠或其它嚙齒類動物來源的細胞系含有逆轉(zhuǎn)錄病毒序列，可能具有感染性。因此，逆轉(zhuǎn)錄病毒是細胞內(nèi)、外源病毒因子檢查中的重要一環(huán)。2025年版藥典對這類檢項進行了多處修改，比如：

①與國際要求一致，在逆轉(zhuǎn)錄病毒項下增加“化學誘導實驗”。

②已有豐富先驗知識的細胞系，如CHO、NS0、Sp2/0、Vero 等，不需要進行化學誘導試驗

③對于昆蟲細胞系，雖不用再進行逆轉(zhuǎn)錄酶活性測定，但需要進行化學誘導試驗以評估細胞中是否存在未知的可被誘導的內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒。參考國外發(fā)表的文獻，如使用IDU進行誘導后進行電鏡觀察或感染性試驗

④對于昆蟲細胞系，主要是諾達病毒、彈狀病毒等問題；而PBMC或CAR-T等人源細胞的潛在DNA皰疹病毒也需要研究檢測

04新增分子生物學檢測法

與國際要求一致，在“細胞內(nèi)、外源病毒因子檢查”項下增加分子生物學方法。與ICH Q5A R2接軌，可以接受經(jīng)驗證的NGS法替代動物體內(nèi)接種法檢測外源病毒，但目前NGS法檢測外源病毒還未有標準化方法，有出現(xiàn)假陽性的可能，目前國際相關(guān)法規(guī)和文獻對NGS方法學開發(fā)和驗證提出了建議和要求。

義翹神州已完成“2025年版《中國藥典》變化及解讀”的PDF版，主要涉及“生物制品生產(chǎn)用動物細胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制（通則0234）”和“生物制品檢定用動物細胞質(zhì)量控制（通則0235）”兩部分。

05義翹神州生物安全檢測平臺

義翹神州在北京和蘇州設(shè)有雙檢測中心（4200m2），并建立了生物安全二級負壓實驗室。實驗室已在北京、蘇州完成備案，并通過CMA和CNAS認證，嚴格按照GMP、GLP和CANS規(guī)范進行設(shè)計與管理。義翹神州的檢測團隊具備扎實的生物醫(yī)學、藥學等相關(guān)專業(yè)背景，具有豐富的經(jīng)驗和專業(yè)的技術(shù)能力，深刻了解并能夠隨時跟蹤中外（如NMPA、FDA、ICH、EMA等）最-新法規(guī)及要求，可全程提供技術(shù)指導，并在項目開展之前提供相關(guān)咨詢。 

義翹神州提供病毒清除驗證和細胞庫檢測方案，為企業(yè)藥品申報保駕護航，助力客戶順利完成IND和BLA的國內(nèi)外申報工作。截止目前，已成功完成5000+樣品的細胞庫檢測及5000多次病毒清除驗證研究，涉及的產(chǎn)品類型有抗體、蛋白、疫苗等。協(xié)助客戶完成近300+項目申報，申報成功率高。

免責聲明：義翹神州內(nèi)容團隊僅是分享和解讀公開的研究論文及其發(fā)現(xiàn)，專注于介紹生物醫(yī)藥研究新進展。本文僅作信息交流用，文中觀點不代表義翹神州立場。隨著對疾病機制研究的深入，新的實驗結(jié)果或結(jié)論可能會修改文中的描述，還請大家理解。

本文不屬于治療方案推薦，如需獲得治療方案指導，請前往正規(guī)醫(yī)院就診。