一、基本概念與來源
定義:牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)是從牛血清中分離的球狀蛋白質(zhì),占牛血清總蛋白的50%-60%,是血漿中含量最豐-富的載體蛋白。
分子特征
分子量:66.5 kDa(非糖基化)
等電點:pH 4.7-4.9
消光系數(shù):E1% = 6.6(280nm)
二、物理狀態(tài)特性
固態(tài)特性
外觀:白色至淡黃色凍干粉末
含水量:≤5%(優(yōu)質(zhì)級)
熱穩(wěn)定性:56℃下可保持10小時不變性
溶液狀態(tài)
溶解性:極易溶于水(1mg/mL可完-全溶解)
構(gòu)象變化:pH<4時發(fā)生N-F轉(zhuǎn)變(天然態(tài)→擴展態(tài))
聚集行為:濃度>50mg/mL時易形成二聚體
三、溶解性能參數(shù)
溶劑類型溶解表現(xiàn)注意事項純水瞬時溶解需避免劇烈振搖PBS緩沖液10秒內(nèi)完-全溶解pH7.4時最穩(wěn)-定生理鹽水溶解速率降低30%可能促進輕微聚集有機溶劑有限溶解乙醇>50%導(dǎo)致沉淀
四、質(zhì)量控制要點
1.純度驗證
電泳純度:SDS-PAGE單一條帶
色譜純度:HPLC峰面積≥98%
2.功能性檢測
脂肪酸結(jié)合能力
酶活性抑制實驗
五、應(yīng)用注意事項
1.溶液配制
推薦使用PBS(pH7.4)
過濾除菌(0.22μm)
2.儲存條件
凍干粉:-20℃(有效期5年)
溶液:4℃保存(1周內(nèi)使用)
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