高熒光亮度：AF594 是一種水溶性的紅熒光染料，熒光亮度高，光穩(wěn)定性好。

pH穩(wěn)定性：在pH 4-10范圍內(nèi)熒光不受影響。

高標(biāo)記效率：通過NHS酯基團(tuán)與生物分子中的伯胺（-NH2）反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵。

高水溶性：磺化結(jié)構(gòu)使其具有良好的水溶性，減少蛋白質(zhì)聚集。 

基礎(chǔ)知識概述:  

英文名：AF594 Ethyl NHS Ester 

規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)：1mg、5mg、10mg 

試劑廠家：陜西新研博美生物科技有限公司

相關(guān)應(yīng)用：

1.蛋白質(zhì)標(biāo)記：

可用于標(biāo)記抗體、蛋白質(zhì)、肽段等生物分子。

2.核酸標(biāo)記：

可用于標(biāo)記胺修飾的寡核苷酸。

3.多色成像：

適用于多色熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)和超分辨成像技術(shù)（如dSTORM、SIM、STED等）。

使用方法：

1.標(biāo)記蛋白質(zhì)：

準(zhǔn)備蛋白質(zhì)儲(chǔ)備液（溶液A）：

將100 μL反應(yīng)緩沖液（如pH 8.5-9.0的1 M碳酸氫鈉溶液）與900 μL目標(biāo)蛋白溶液（濃度>2 mg/mL）混合。

蛋白質(zhì)溶液的pH值應(yīng)為8.5±0.5。

準(zhǔn)備染料儲(chǔ)備液（溶液B）：

將無水DMSO加入AF594 NHS酯中，制備10 mM儲(chǔ)備溶液。

染料儲(chǔ)備溶液應(yīng)在制備后立即使用，避免長期保存。

進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)：

使用10:1的摩爾比（染料/蛋白質(zhì)）作為起始點(diǎn)，將5 μL染料儲(chǔ)備液加入到95 μL蛋白質(zhì)溶液中。

在室溫下孵育30-60分鐘。

純化偶聯(lián)物：

使用Sephadex G-25柱純化染料-蛋白質(zhì)偶聯(lián)物。

2.標(biāo)記寡核苷酸：

按照類似步驟進(jìn)行標(biāo)記，調(diào)整反應(yīng)條件以適應(yīng)寡核苷酸。

包裝：

質(zhì)量控制：95%+